【摘 要】
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目的构建以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)作为报告基因、带有脊髓小脑性共济失调3型(SCA3)基因的真核细胞表达载体,并转染PC12细胞,观察外源基因的表达情况.方法将含有正常和突变
【机 构】
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广州军区广州总医院高压氧科,中山大学附属第一医院神经科
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目的构建以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)作为报告基因、带有脊髓小脑性共济失调3型(SCA3)基因的真核细胞表达载体,并转染PC12细胞,观察外源基因的表达情况.方法将含有正常和突变SCA3基因的pcDNA3.0-ataxin3 Q28(基因内CAG重复28次)、pcDNA3.0-ataxin3 Q84(基因内CAG重复84次)双酶切,水解片段插入pEGFP-C1,测序鉴定后脂质体转染法转染PC12细胞并优化转染条件,荧光显微镜观察EGFP的表达,Western印迹检测目的蛋白ataxin3的表达.结果真核
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