【摘 要】
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目的 观察脂肪来源间充质干细胞(ADSCs)在经氯化钴(CoCl2)预处理的条件下,其增殖、细胞状态变化以及成脂肪化倾向.方法 通过有限稀释法分离、培养SD大鼠ADSCs,取第3代ADSCs,
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目的 观察脂肪来源间充质干细胞(ADSCs)在经氯化钴(CoCl2)预处理的条件下,其增殖、细胞状态变化以及成脂肪化倾向.方法 通过有限稀释法分离、培养SD大鼠ADSCs,取第3代ADSCs,分别向骨细胞、脂肪细胞定向诱导分化鉴定,利用流式细胞仪检测大鼠ADSCs细胞表面标志物CD29,CD34,CD44,CD45的表达.将ADSCs经不同浓度CoCl2干预,利用Western blot检测缺氧诱导因子1α(HIF-1 α)的表达情况.同时,利用MTT实验来检测大鼠ADSCs在不同浓度的CoC12下细胞增殖的改变;并且通过油红O定量检测大鼠ADSCs在经历缺氧后的成脂情况.结果 第3代ADSCs在倒置显微镜下观察,大多呈梭形,经流式鉴定,大鼠ADSCs细胞表面标志物CD29、CD44表达率高,而CD34、CD45表达率低,体外诱导培养的大鼠ADSCs能够向成骨细胞和成脂细胞分化,具有较高的自我更新能力.在MTT实验中,400、200 μmol/L CoC12组,ADSCs增值减弱;而100、50 μmol/L CoC12的实验组,缺氧造成的对细胞增殖和细胞毒性与空白对照组相比,没有变化(P＞0.05).HIF-1α的表达随着培养基中的CoC12的浓度而增加.在光镜下观察发现,随着CoCl2浓度的升高以及时间的延长,大鼠ADSCs的成脂倾向越发明显(P＜0.001).结论 ADSCs在处于体外适量的CoC12干预情况时,其增殖并不会受到影响,并且呈显著的增强其成脂倾向.
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