重组人A20蛋白在巴斯德毕赤酵母GS115中的表达

来源 :第三军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：haozi77805

【摘要】

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目的利用酵母表达技术制备重组人A20蛋白（rhA20），为进一步研究其在脓毒血症中的治疗作用奠定基础。方法利用基因工程技术构建rhA20毕赤酵母表达载体yevCFP-hA20，电转化巴斯德毕赤

【作者】

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吴丽娟蒋建新朱佩芳康格非

【机构】

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第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室、全军交通医学研究所、全军交通医学实验室、创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆医科大学检验系

【出处】

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第三军医大学学报

【发表日期】

：

2006年3期

【关键词】

：

A20 基因表达巴斯德毕赤酵母基因工程 A20 gene expression Pichia pastoris genetic engineer

【基金项目】

：

国家科技部创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室开放基金资助项目（2003）

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目的利用酵母表达技术制备重组人A20蛋白（rhA20），为进一步研究其在脓毒血症中的治疗作用奠定基础。方法利用基因工程技术构建rhA20毕赤酵母表达载体yevCFP-hA20，电转化巴斯德毕赤酵母菌株GSl15，筛选高拷贝阳性菌株，甲醇诱导表达rhA20。产物用SDS-PAGE和Western Blot鉴定。同时对诱导表达培养基的pH值和配方，以及培养环境温度等条件进行了优化研究。结果表达产物分子量约93×10^3，表达条件的优化研究提示：降低诱导培养基pH值、添加低剂量EDTA、蛋白酶水解物和

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