【摘 要】
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选取兔透明带ZPC基因序列的部分片段(编码263-415位的氨基酸,rZP3′)作为靶抗原,构建兔ZP3′基因疫苗,研究其阻断受精的效果。提取成熟雌兔卵巢的总RNA,RT-PCR克隆兔透明带ZPC的cDN
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选取兔透明带ZPC基因序列的部分片段(编码263-415位的氨基酸,rZP3′)作为靶抗原,构建兔ZP3′基因疫苗,研究其阻断受精的效果。提取成熟雌兔卵巢的总RNA,RT-PCR克隆兔透明带ZPC的cDNA,直接插入到克隆质粒PCR○ R 2.1中,构建克隆质粒PCR○ R 2.1-rZPC′,再将靶片段用Hind Ⅲ、X-bal双酶切从克隆质粒PCR○ R 2.1-rZPC′切下,1%的低熔点琼脂糖电泳回收,亚克隆到真核表达质粒pCMV4中,构建真核表达质粒pCMV4-rZPC′。将质粒直接注射到活体小鼠的大腿内侧肌肉中,在mRNA水平上观察到质粒能在肌肉细胞中正确表达,并且其表达可以维持12周以上。
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