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目的:建立检测小鼠Toll样受体4(TLR4)mRNA表达水平的SYBR GreenⅠ实时定量PCR实验;观察小鼠骨髓源树突状细胞(DC)发育成熟过程中TLR4 mRNA表达水平的动态变化以及地塞米松(DEX)对DCTLR4 mRNA表达的影响。方法:(1)用细胞因子定向诱导的方法将小鼠骨髓细胞培养为DC;(2)构建pUCm-T/TLR4和pUCm-T/β-actin重组质粒,建立检测小鼠TLR4 mRNA水平的实时定量PCR实验;(3)用实时定量PCR技术对体外培养4、6、8、10、12d的DCTLR4 mRNA表达水平进行动态观察;(4)在DC培养体系中加入DEX,与常规培养DCTLR4 mRNA表达水平进行比较。结果:(1)从小鼠骨髓细胞中成功诱导培养了DC,经免疫磁珠纯化后其纯度可达90%以上;(2)建立了能精确分析小鼠TLR4 mRNA表达水平的SYBR GreenⅠ实时定量PCR实验;(3)在DC培养前期TLR4 mRNA表达水平变化不大,后期则明显升高;(4)DEX可使DCTLR4 mRNA表达增强。结论:小鼠骨髓源DCTLR4 mRNA表达水平与其发育成熟阶段密切相关;DEX促进DCTLR4 mRNA表达。