【摘 要】
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目的 研究miR-489对卡铂的协同抗乳腺癌效应及机制.方法 MTT细胞活力试验检测卡铂和miR-489对T-47D细胞的杀伤活性.生物信息擘、Western blot试验及荧光素酶报告基因试验验证
【机 构】
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宁波市医疗中心李惠利医院放疗科,浙江宁波,315000
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目的 研究miR-489对卡铂的协同抗乳腺癌效应及机制.方法 MTT细胞活力试验检测卡铂和miR-489对T-47D细胞的杀伤活性.生物信息擘、Western blot试验及荧光素酶报告基因试验验证X连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP)是否为miR-489的靶点.分离去除T-47D细胞中的线粒体,Western blot试验检测miR-489、卡铂及XIAP质粒处理后T-47D细胞Smac/DIABLO的释放和caspase-9及caspase-3的活化.免疫共沉淀试验检测XIAP与Smac/DIABLO的相互作用.流式细胞术检测T-47D细胞的凋亡情况.结果 miR-489处理能显著增强卡铂对T-47D细胞的杀伤活性.XIAP是miR-489的靶点.miR-489不影响卡铂依赖的线粒体中Smac/DIABLO的释放,但能通过下调XIAP的表达减弱XIAP与Smac/DIABLO的相互作用.另外,转染XIAP质粒能显著抑制miR-489对卡铂的协同抗乳腺癌效应,XIAP质粒能显著抑制miR-489联合卡铂对T-47D细胞凋亡的诱导.XIAP质粒能显著抑制miR-489联合卡铂对T-47D细胞caspase-9及caspase-3的活化.结论 miR-489抑制XIAP的表达发挥对卡铂的协同抗乳腺癌作用.
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