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为了对猪Kobu病毒进行快速诊断及流行病学监测，根据GenBank中公布的9条猪Kobu病毒基因组全序列，在3CD非结构蛋白保守区域设计并合成了2对特异性引物，建立了猪Kobu病毒的巢式RT-PCR检测方法，并用该方法对猪Kobu病毒DX株动物回归试验发病的25头仔猪的组织病料以及送检的72份临床样本进行检测。结果表明，使用该方法对25头发病猪内脏病料的阳性检出率为100％；对送检的72份临床样品的阳性检出率为87．5％（63／72）。该方法特异性强、灵敏度高、重复性好，适用于猪Kobu病毒的临床快速诊断