神经营养素3基因克隆及其真核表达载体的构建

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目的克隆大鼠神经营养素-3(NT-3)基因的表达序列,构建大鼠NT-3基因真核表达载体。方法应用RT-PCR从大鼠脑组织总RNA中扩增NT-3基因cDNA,将其克隆到真核表达载体pcDNA3中构建重组质粒pcDNA3-N3,用限制酶酶切鉴定和DNA序列分析鉴定重组质粒。结果RT-PCR产物为822bp的特异片段,重组质粒酶切后产生822bp和5.2kb片段,DNA测序证实822bp片段的碱基序列与大鼠NT-3cDNA序列完全一致。结论成功克隆大鼠NT-3基因表达序列并构建了NT-3基因真核表达载体pcDNA3-N3。
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