【摘 要】
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目的检测小檗碱对食管癌细胞增殖、周期和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法 MTT法检测细胞的增殖抑制作用;碘化丙啶(Propidium iodide,PI)染色法检测细胞周期进程;Annexin
【机 构】
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新乡医学院基础医学院医学微生物学教研室,新乡医学院医学检验学院免疫学检验教研室
【基金项目】
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河南省高校科技创新人才项目(15HASTIT040);新乡医学院研究生科研创新支持计划(YJSCX2016082)
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目的检测小檗碱对食管癌细胞增殖、周期和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法 MTT法检测细胞的增殖抑制作用;碘化丙啶(Propidium iodide,PI)染色法检测细胞周期进程;Annexin V-FITC和PI双染法结合流式细胞技术检测小檗碱的凋亡诱导作用;Western blot技术检测小檗碱对胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)的活化及下游主要信号分子AKT和p44/42MAPK(ERK)磷酸化水平的影响。结果小檗碱在体外可浓度依赖性地抑制四种食管癌细胞系的增殖,且其IC50值与细胞表面IGF-1R的表达水平呈负相关。小檗碱可使细胞阻滞在G2/M期。细胞凋亡实验结果显示,小檗碱可浓度依赖性地诱导食管癌细胞发生凋亡,并且在相同浓度下KYSE450细胞(IGF-1R高表达)的凋亡率显著高于KYSE150细胞(IGF-1R低表达)。Western blot结果显示,小檗碱处理可显著抑制IGF-1R的磷酸化,并抑制AKT和ERK的活化,且抑制作用随着小檗碱浓度的增加而增强。结论小檗碱可通过对IGF-1R及其介导的下游信号通路的调控来发挥抑制食管癌细胞增殖、阻断细胞周期进程以及诱导食管癌细胞凋亡的作用。
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