【摘 要】
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刚果红显色法及革兰氏碘液显色法是进行产纤维素酶真菌筛选的常用方法，但存在显色不够明显和易受培养基成分干扰等缺点．建立方便、灵敏的产纤维素酶真菌筛选新方法，有助于快捷准确地筛选产纤维素酶真菌的菌株．真菌产生的纤维素酶会导致培养基中的纤维素底物水解，产生纤维寡糖，且寡糖产量与纤维素酶活力正相关．适当条件下，寡糖氧化酶可将培养液中的纤维寡糖全部氧化，产物为等摩尔的寡糖酸及过氧化氢，而过氧化氢可通过辣根过
【机 构】
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深圳大学生命与海洋科学学院深圳市微生物基因工程重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（22078199）； 深圳市基础研究计划资助项目（JCYJ20200109105210448）；
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刚果红显色法及革兰氏碘液显色法是进行产纤维素酶真菌筛选的常用方法，但存在显色不够明显和易受培养基成分干扰等缺点．建立方便、灵敏的产纤维素酶真菌筛选新方法，有助于快捷准确地筛选产纤维素酶真菌的菌株．真菌产生的纤维素酶会导致培养基中的纤维素底物水解，产生纤维寡糖，且寡糖产量与纤维素酶活力正相关．适当条件下，寡糖氧化酶可将培养液中的纤维寡糖全部氧化，产物为等摩尔的寡糖酸及过氧化氢，而过氧化氢可通过辣根过氧化物酶显色体系进行显色，颜色深浅可以直观反映酶活力高低．首先，利用寡糖氧化酶-辣根过氧化物酶显色方法对寡糖浓度及纤维素酶活力进行分析，发现在一定浓度范围内，光密度值与寡糖浓度及纤维素酶浓度均存在良好的线性关系．然后，在中国广东省深圳市塘朗山的林地采样，将浸提的菌液稀释，涂布到改良的马丁氏培养基平板．待长出单菌落后，将这些单菌落在含改良马丁氏培养基的24孔板中培养96 h，离心后取培养上清液加入到寡糖氧化酶-辣根过氧化物酶纤维素体系中进行显色，根据颜色深浅对产纤维素酶菌株进行初筛．最后，采用纤维素酶产酶培养基对初筛菌株进行复筛，获得了15株具有较高产纤维素酶能力的真菌，并对这些菌株进行了初步的鉴定．本研究为产纤维素酶真菌的筛选提供了一种明确而简单的方法．
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