【摘 要】
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目的 构建人心肌肌钙蛋白I(cTnI)基因的原核表达重组体并鉴定.方法 利用RT-PCR方法从人心肌细胞的总RNA中克隆出编码人cTnI的cDNA片段,设计引物将其第二和第四个密码子突变后
【机 构】
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咸宁学院医学院,咸宁学院医学院生物化学与分子生物学教研室
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目的 构建人心肌肌钙蛋白I(cTnI)基因的原核表达重组体并鉴定.方法 利用RT-PCR方法从人心肌细胞的总RNA中克隆出编码人cTnI的cDNA片段,设计引物将其第二和第四个密码子突变后插入原核表达载体形成重组体,并导入宿主菌BL21(DE3)中,采用双酶切及PCR方法鉴定后测序.结果 经PCR扩增成功获得699bp的cTnI基因,重组体酶切分析及PCR显示结果与预想一致,测序正确.结论 成功克隆了cTnI基因并构建了原核表达重组体.
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