【摘 要】
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目的 观察c-myc小干扰RNA(siRNA)联合氟尿嘧啶(5-Fu)抑制喉癌Hep-2细胞生长的体内外作用,探讨在喉癌治疗中将c-myc作为基因治疗靶点的价值.方法 利用RNA干扰技术将c-myc siRN
【机 构】
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郑州大学第一附属医院耳鼻咽喉头颈外科,郑州大学第一附属医院手术室,郑州大学基础医学院病理乍理学教研室
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目的 观察c-myc小干扰RNA(siRNA)联合氟尿嘧啶(5-Fu)抑制喉癌Hep-2细胞生长的体内外作用,探讨在喉癌治疗中将c-myc作为基因治疗靶点的价值.方法 利用RNA干扰技术将c-myc siRNA转染到喉癌Hep-2细胞中,Western blot法检测c-myc蛋白的表达,流式细胞仪检测c-myc siRNA与5-Fu单独或联合应用,对喉癌细胞周期的影响.构建裸鼠移植瘤模型,观察c-myc siRNA及联合5-Fu对肿瘤生长的影响.免疫组织化学法检测c-myc在肿瘤组织中的表达;脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal-deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling,TUNEL)检测肿瘤组织细胞的凋亡情况.结果 在转染c-myc siRNA后的喉痛Hep-2细胞中,c-myc 蛋白的表达水平逐渐下调;G0-G1期的细胞开始增加,同时S期的细胞逐渐减少;当转染c-myc siRNA 细胞联合使用5-Fu时,G0-G1期的细胞明显增加,为(79.3.±2.1)%,同时S期的细胞减少为(17.5±1.7)%.c-myc siRNA联合5-Fu组移植瘤生长最慢,与c-myc siRNA组和5-Fu组相比差异有统计学意义(t值分别为44.170和78.988,P＜0.05);c-myc siRNA+5-Fu组治疗的移植瘤重量明显小于对照组,也小于c-myc siRNA组和5-Fu组(P值均＜0.05).免疫组织化学结果显示,c-myc siRNA及其联合5-Fu组肿瘤组织中c-myc蛋白的表达下调,肿瘤细胞的凋亡数明显增加高于单用5-Fu组(t=-17.871,P＜0.05).结论 c-myc siRNA可特异性地下调Hep-2细胞和裸鼠组织中c-myc的表达,联合5-Fu时,可显著抑制喉癌移植瘤的生长,促进肿瘤细胞的凋亡,表明c-myc可能是喉癌基因治疗中一个重要的分子靶点.
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