目的探讨褪黑素(Mel)联合顺铂(DDP)、甲氨蝶呤(MTX)对骨肉瘤细胞系Sa OS-2增殖的影响,以及Mel与DDP、MTX是否具有协同抗肿瘤作用。方法 Mel、DDP、MTX、Mel+DDP、Mel+MTX作用于Sa OS-2细胞后,CCK-8法检测药物对细胞活性的影响,应用Compusyn软件分析药物的合并效应,流式细胞术分析细胞周期分布及细胞凋亡率。结果与对照组相比,Mel、DDP、MTX单独均能显著降低Sa OS-2细胞活性(P均<0.05),且呈剂量-效应关系。与单用DDP或MTX相比,Mel与DDP或MTX联合应用能显著降低Sa OS-2细胞的活性(P均<0.05)。1 mmol/L的Mel与6.67、16.67、33.33、66.66μmol/L的DDP合用时,联合用药指数(CI)分别为1.18、1.21、1.09、0.84,与0.1、0.5、1、2、4 mmol/L MTX合用后,CI分别为0.88、0.88、0.83、0.78、0.81。与对照组相比,Mel组与Mel+MTX组的G1期细胞比例显著增多(P均<0.05),S期细胞比例显著减少(P均<0.05);MTX组的S期细胞比例显著增多(P均<0.05)。药物作用组的细胞凋亡率均显著高于对照组(P均<0.05),联合用药组的细胞凋亡率显著高于单药组(P均<0.05)。结论 Mel在体外能抑制Sa OS-2细胞的活性,阻滞细胞周期于G1期,诱导凋亡,发挥抗肿瘤效应,与较低浓度DDP呈拮抗效应,而与MTX、较高浓度DDP联合应用时呈协同抗肿瘤效应。