梅毒螺旋体特异性抗原TpN47基因片段的克隆与表达

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目的在大肠埃希菌中表达梅毒螺旋体(Tp)TpN47(68-410aa)重组蛋白。方法采用PCR法从Tp全基因组中扩增TpN47(202—1230bp)片段,T-A克隆后构建原核表达质粒pET-22b(+)-TpN47,经酶切鉴定后转化E coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,表达产物经Ni^2+亲和层析柱纯化,Westem blot鉴定其免疫反应性。结果PCR法扩增出约1000bp的目的片段,原核表达质粒pET-22b(+)-TpN47经酶切鉴定正确,表达的蛋白约占菌体总蛋白的43%,相对分子质
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