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以黑暗链霉菌Tt-49基因组为模板，利用PCR方法，扩增安普霉素生物合成关键基因aprH-M的上、下游序列，作为同源交换臂，并以温敏复制型质粒pKcll39为基础，构建用于阻断黑暗链霉菌Tt-49中安普霉素生物合成的重组质粒pHMl06。质粒经接合转移进入黑暗链霉菌Tt-49，并筛选得到发生同源双交换工程菌，命名为黑暗链霉菌HMl06。通过PCR鉴定，证明工程菌HMl06中的aprH-M被tet^r替换。对工程菌HMl06进行发酵产物分析，结果是其发酵效价下降明显，仅为出发菌株的40％左右。采用薄层层析（