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目的
探讨高糖对肾小球系膜细胞内Notch信号通路、转化生长因子β(TGF-β)及纤维连接蛋白(FN)表达的影响及百令提取液的作用,以进一步阐明百令提取液的肾保护的作用机制。
方法将大鼠肾小球系膜细胞(HBZY-1)分为5组:正常对照组(5.5 mmol/L葡萄糖)、高渗透浓度对照组(5.5 mmol/L葡萄糖+19.5 mmol/L甘露醇)、高糖组(25.0 mmol/L葡萄糖)、Notch抑制剂DAPT组(25.0 mmol/L葡萄糖+1 μmol/L DAPT)和百令提取液干预组(25.0 mmol/L葡萄糖+10 mg/L百令提取液)。采用MTT法检测各组细胞增殖能力,Western印迹和实时定量PCR法分别检测Notch信号通路相关分子(Notch1、Jagged1、Hes1)、TGF-β及FN的蛋白和mRNA表达。
结果与正常对照组比较,高糖组HBZY-1细胞增殖显著增加,细胞内Notch信号相关分子(Notch1、Jagged1、Hes1)mRNA和蛋白表达均显著上调,TGF-β、FN的mRNA和蛋白表达均显著增加(均P<0.05)。与高糖组比较,DAPT组和百令提取液干预组HBZY-1细胞增殖均显著降低,Notch信号相关分子(Notch1、Jagged1、Hes1)、TGF-β和FN的mRNA和蛋白表达均显著降低(均P<0.05)。
结论百令提取液可能通过抑制Notch信号通路和TGF-β通路异常活化,降低高糖诱导系膜细胞增殖,减少细胞外基质聚积,从而发挥肾脏保护作用。