【目的】研究中药催情散对小鼠的急性毒性和对大鼠的亚慢性毒性，为催情散在奶牛持久黄体治疗中的应用提供参考。【方法】制备1 g/mL（以生药计）的催情散药液，选取60只小鼠，随机分为6组，其中5个急性毒性试验组分别按20 000，16 000，12 800，10 240和8 192 mg/kg剂量一次性灌服催情散药液，对照组灌服等体积自来水，连续观察7 d，记录中毒症状和死亡数并计算半数致死量（LD50）；另取20只小鼠随机分为给药组和对照组2组，给药组于12 h内分3次给小鼠灌胃1 g/mＬ催情散药液，每次灌胃体积为每20 g体质量0.8 mＬ（最大灌胃体积），对照组灌服等体积自来水，连续观察7 d，记录中毒症状、死亡数并确定最大耐受量；取40只大鼠，随机分为催情散高、中、低剂量给药组和对照组，给药组分别按10 000，5 000和2 500 mg/kg剂量灌服给药，对照组灌服等体积自来水，连续灌服30 d，灌药前和灌药第7，14，21，28和30天称量大鼠体质量、检测血常规和血液生化指标、测定脏器系数并观察组织病理学变化情况。【结果】急性毒性试验各剂量组均无小鼠死亡，故无法计算LD50；小鼠对催情散的最大耐受量为120 g/kg，表明该受试药物无毒。亚慢性毒性试验中，各给药组大鼠体质量、血常规、血液生化指标和脏器系数与对照组相比差异不显著（P>0.05）；病理剖检和组织切片观察发现，除了由于心脏采血导致部分心肌纤维出现坏死和间质血管出血外，其他各器官组织未见明显异常变化。【结论】中药催情散实际无毒，临床按推荐剂量使用不会对奶牛产生毒害作用。