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通过设计牛双芽巴贝斯虫热休克蛋白HSP20基因序列的特异性引物，采用PCR方法从疑似“牛焦虫病”的患牛全血基因组中扩增得到699bp的HSP20基因，将其连人pMD18-T测序、鉴定，再将验证的699bp的HSP20基因克隆至真核表达载体pcDNA3．1（＋）中，构建真核载体PCDNA3．1-HSP20。经再次测序、鉴定后，尾静脉注射小白鼠进行HSP20基因的瞬时表达，取其肝脏提取总RNA，经RT—PCR方法扩增出一条534bp的目的条带，表明真核表达质粒构建成功。