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以玉米自交系QCL1094为材料，用RNAiso Reagent、柱式试剂盒法、异硫氰酸胍法等3种方法提取苗期叶片总RNA，用PrimeScript^TM 1st Strand cDNA Synthesis Kit反转录获得第一链cDNA，用RNase H、E．coli DNA聚合酶I和E．coli DNA连接酶合成第二链cDNA，用T4 DNA聚合酶进行末端平滑得到双链cDNA，最后，用双低频酶EcoR I和Pst I酶切双链cDNA，用T4DNA连接酶连接接头，用引物EA00和P00进行预扩增，用引物