【摘 要】
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为开发RNAi转基因作物的田间可视化鉴定方法,以DNA嵌合染料SYBR Green Ⅰ为材料,采用设置重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA)特异性引物的手段,建立了 一种快速、低成本、可视化的RPA用于转基因大豆\'B5C9123-5\'的检测.结果表明,在靶标不存在时,RPA体系中游离的SYBR Green I染料使溶液呈现较弱的黄色荧光.在靶标存在的情况下,RPA扩增产生的双链DNA与SYBR Green I结合导致溶液从黄色转变为
【机 构】
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昆明理工大学农业与食品学院,昆明650504;中国农业大学食品科学与营养工程学院/北京食品营养与人类健康高精尖创新中心,北京100083;农业农村部农业转基因生物安全评价(食用)重点实验室,北京100
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为开发RNAi转基因作物的田间可视化鉴定方法,以DNA嵌合染料SYBR Green Ⅰ为材料,采用设置重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA)特异性引物的手段,建立了 一种快速、低成本、可视化的RPA用于转基因大豆\'B5C9123-5\'的检测.结果表明,在靶标不存在时,RPA体系中游离的SYBR Green I染料使溶液呈现较弱的黄色荧光.在靶标存在的情况下,RPA扩增产生的双链DNA与SYBR Green I结合导致溶液从黄色转变为绿色并使荧光迅速增强.通过对RPA扩增时间和温度进行优化,阳性结果可在20 min内用肉眼鉴别,检测限为1.00 ng/μL.通过设置不同RPA引物,该方法可用于现场快速检测多种RNAi转基因作物.
其他文献
为研究山西省不同小麦品种的耐盐性以及筛选适用于山西盐碱地种植的小麦品种,本研究以40个山西省各麦区主推的小麦品种为材料,分别在芽期和苗期对其进行盐胁迫(1.2％NaCl)处理,分析盐胁迫对小麦芽期和苗期各形态指标的影响,并利用耐盐性综合评价值(D),对供试材料的耐盐性进行评价.结果表明:除芽期根鲜重和苗期根数以外,小麦芽期和苗期的各项形态指标均受到盐胁迫的影响,但不同指标对盐胁迫的敏感度存在差异;共筛选出芽期耐盐型品种9个,占供试材料的22.5％,苗期耐盐型品种11个,占供试材料的27.5％;芽期和苗期皆
为探寻黑龙江省第二积温带水稻育种多 目标性状优化方案,利用7个主推水稻品种的22个农艺性状值和NSGA-Ⅱ遗传算法、熵权综合评价法,对适宜的育种目标性状参数值进行分析.结果表明:黑龙江省第二积温带水稻育种各优化参数值为:食味品质分值90.9～94.5分,较供试品种均值增加8.5～13.0分;产量9 916.3～10 959.8 kg/hm2,较供试品种均值增加799.0～1 842.5 kg/hm2.本研究提出的育种多 目标优化设计方法可统筹设计不容易兼顾的育种多目标性状,以便获得更加合理的育种方案.综上
为鉴定和筛选水稻苗期耐冷种质资源,采用主成分分析法,结合形态学和光合生理指标,对52份水稻种质资源的苗期耐冷性指标进行综合评价.结果表明,根据相关分析显示6个光合生理指标与形态学指标黄叶率之间均呈负相关关系;主成分分析将7个单项指标转换成3个相对独立的综合指标,累计贡献率达83.991％;根据耐冷性综合评价值(D),将52个品种划分为极强耐冷、强耐冷、中耐冷,弱耐冷及冷敏感5类,共筛选出\'东农4号\'、\'合江4号\'和\'津原85\'3份苗期耐冷性极强的品种;回归分析表明利用该
[目的]冬干春旱、土壤有机质和速效磷缺乏是四川丘陵旱地冬小麦生产的主要限制因素,通过研究休闲期秸秆覆盖还田和施磷对旱地冬小麦产量和磷素吸收利用的影响,以期为四川丘陵旱地小麦高产稳产及磷素高效利用提供技术方案.[方法]试验于2018-2020年在四川仁寿进行,采用裂区设计,以秸秆覆盖(SM)和不覆盖(NSM)为主区;3个磷水平0(P0)、75 kg·hm-2(P75)和120(P120)kg·hm-2为副区.分析秸秆覆盖和施磷下小麦干物质积累与转运、产量性状及磷素吸收利用的差异.[结果]秸秆覆盖的增产效应高
为了减小特异性、一致性和稳定性(Distinctness,uniformity and stability,DUS)测试中的数量性状观测误差,提高测量精度,本研究以种植于上海的30个萱草品种为试材,比对了定植时间、测量时期和观测部位对DUS测试数量性状的影响,分析了数量性状间的相关性,探讨了通过其它性状推测花直径的可行性.结果表明:定植时间主要影响叶丛、叶片和花葶3个部位的数量性状;移栽会影响其性状表达,第2个生长季叶丛高度和直径、叶片长度和宽度、花葶长度和粗度及花数量均明显大于第1个生长季观测值,大部分
[目的]探究抗氧化剂-水溶性维生素E的类似物(Trolox)通过调控活性氧对猪肌肉干细胞增殖及分化过程产生的影响,为进一步优化培养肉种子细胞在体外增殖及分化过程提供研究基础.[方法]首先在猪肌肉干细胞增殖过程中,添加不同浓度(0、50、100和200 μmol·L-1)的Trolox培养3 d,利用血细胞计数板进行细胞计数,统计细胞增殖倍数,同时利用CCK8技术检测不同浓度的Trolox对细胞增殖的影响;利用RT-qPCR技术检测不同浓度Trolox处理后表征干性的PAX7表达水平,Western Blo
为鉴定抗除草剂转基因大豆新品种\'GE-J12,的外源基因插入拷贝数,以该转化体的外源插入目的基因G2-EPSPS和GAT的序列、3\'转化体特异性序列为靶序列,设计PCR扩增引物和TaqMan探针,并对引物探针特异性进行鉴定,同时以大豆内标基因Lectin为参照,建立微滴数字PCR拷贝数检测体系.特异性试验结果显示,只有以抗除草剂转基因大豆\'GE-J12\'基因组DNA为模板才有扩增信号.以单株转基因大豆\'GE-J12,基因组DNA为模板,进行外源目的基因G2-EPSPS和GAT
为鉴定\'GR891\'和\'新选048\'2个木薯(Manihiot esculenta Crantz)品种抗细菌性枯萎病等级,分析木薯叶片侵染病原菌后PAL(苯丙氨酸解氨酶)、SOD(超氧化物歧化酶)、POD(过氧化物酶)、PPO(多酚氧化酶)和CAT(过氧化氢酶)5种酶活性,并研究细菌性枯萎病与酶活性关系.利用喷雾法接种木薯叶片评价抗细菌性枯萎病等级,分光光度法测定POD、SOD、CAT和PAL酶活性,采用碘滴定法测定PPO酶活性.结果表明:感病的\'新选048,木薯叶片的病斑长
为探究遮光处理对马铃薯植株光合作用和产量的影响,以12个马铃薯品种原原种为试验材料,苗齐后设置正常光照(CK)、单层遮光网遮盖处理(Z1)、双层遮光网遮盖处理(Z2),间隔取样测量期为14 d,分别测定叶绿素相对含量(SPAD)、荧光参数(Fv/Fm)、光合生理指标(蒸腾速率Tr、气孔导度Gs、净光合速率Pn和胞间C02浓度Ci)、单株产量、干物质含量和单株块茎干物质质量.结果表明,遮光处理导致叶片的SPAD下降,部分品种在遮光处理下叶片提早枯萎;遮光处理初期Z1 和Z2叶片的Fv/Fm高于CK,而随着处
为了解microRNAs在马医学临床诊断、预测和治疗中的应用,本研究通过整理相关文献并进行分析,概括了 microRNAs在马中的研究进展.结果表明:1)在马的正常和病变组织中,microRNAs存在差异表达,可以通过靶向抑制关键调节因子,参与调控病症相关信号通路;2)在赛马运动过程中,microRNAs的表达与能量代谢相关调控因子以及血液生理生化指标呈现一定相关性,可以用于研究运动性能相关的新型分子标记物;3)在马的繁殖方面,microRNAs被发现其靶基因可参与胎盘、胚胎、睾丸和精子的生长发育,与马的