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对组氨酸标签肝素酶I（His．HepI，Ec4．2．2．7）的热失活机制进行了研究。针对短暂低温处理可以使热失活His．HepI酶活部分恢复及添加二硫苏糖醇（D1Tr）使其热稳定性提高的现象，利用荧光探针法研究了失活过程His．HepI构象变化，证明了该酶构象存在可逆转变行为。为进一步明晰His．HepI的热失活机制，假设该酶热失活的主要途径包括去折叠及形成聚集体，并以此为基础建立模型进行拟合，模型与实验值吻合良好，表明假设的合理性。根据模型计算的活化能为Er=100．217kJ／mol、Eir=7．85