【摘 要】
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利用简并PCR和TAIL-PCR从嗜热特异腐质霉Humicola insolens Y1中克隆得到一个新的耐热型木聚糖酶基因xynD。该基因全长1 104 bp,共编码367个氨基酸,不含有内含子,N端的22个氨
【机 构】
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广州医科大学,中国农业科学院生物技术研究所
【基金项目】
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国家863计划项目(2012AA022105)资助.
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利用简并PCR和TAIL-PCR从嗜热特异腐质霉Humicola insolens Y1中克隆得到一个新的耐热型木聚糖酶基因xynD。该基因全长1 104 bp,共编码367个氨基酸,不含有内含子,N端的22个氨基酸为信号肽。成熟蛋白在毕赤酵母中进行了重组表达,重组蛋白经超滤和离子交换柱纯化后达到电泳纯。对其酶学性质分析表明,XynD的最适pH为6.0,在pH 4.0~7.0可以保持80%以上的酶活性,在pH 5.0~10.0具有良好的pH稳定性。最适作用温度为70℃,在60℃条件下保持稳定。多数金属离子
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