【摘 要】
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目的:探究低强度脉冲式超声波(low-intensity pulsed ultrasound,LIPUS)对巨噬细胞极化与吞脂能力的潜在影响及其相关分子机制.方法:采用胫骨骨髓灌注法提取小鼠骨髓来源的巨
【机 构】
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南京医科大学第一附属医院心内科,江苏南京210029;东南大学医学院,江苏南京211189
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目的:探究低强度脉冲式超声波(low-intensity pulsed ultrasound,LIPUS)对巨噬细胞极化与吞脂能力的潜在影响及其相关分子机制.方法:采用胫骨骨髓灌注法提取小鼠骨髓来源的巨噬细胞,分别用不同强度(4.825、19.300、43.425 mW/cm2)的LIPUS对巨噬细胞进行辐照处理,再给予脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导巨噬细胞向M1型极化;采用流式细胞术检测巨噬细胞凋亡水平;CCK-8法检测巨噬细胞活性;热电偶测温技术检测LIPUS热效应;实时荧光定量PCR(qPCR)分析M1型巨噬细胞标志基因的mRNA水平;Western blot检测NF-κB/MAPK通路相关蛋白表达;采用荧光染料DiI标记的氧化低密度脂蛋白与巨噬细胞共同孵育6h,荧光显微镜观察并计算巨噬细胞的脂滴吞噬效率.结果:流式细胞术和CCK-8结果表明,不同强度LIPUS辐照处理均未对巨噬细胞的凋亡和细胞活性产生影响;热电偶测温技术表明,温度变化稳定,未产生明显热效应.qP-CR结果显示,与对照组相比,LPS能显著上调巨噬细胞M1表型基因的mRNA水平,而LIPUS辐照处理可下调LPS诱导的M1表型基因mRNA水平,差异具有统计学意义;脂滴吞噬染色结果显示,LPS能够增强巨噬细胞的吞脂作用,而LIPUS辐照处理能减弱LPS对巨噬细胞吞脂能力的促进作用,差异具有统计学意义;Western blot结果显示,LIPUS能够下调LPS诱导的NF-κB/MAPK通路蛋白水平,差异具有统计学意义.结论:LIPUS可能通过抑制LPS活化的NF-κB/MAPK通路阻止巨噬细胞向M1型极化以及减弱巨噬细胞的吞脂能力.
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