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目的
探讨未成熟脑在缺氧缺血（HI）后细胞色素C释放的时相变化及细胞色素C释放与半胱天冬酶的激活和DNA损伤的关系。
方法7日龄Wistar新生大鼠在缺氧缺血后不同时间点处死取脑，部分脑组织进行手工匀浆分离胞浆和线粒体成分进行Western蛋白印迹检查，部分进行组织切片用于细胞色素C免疫组化染色和免疫荧光双染色。
结果Western蛋白印迹显示线粒体中细胞色素C在HI后1h未见明显变化，HI后14hHI侧较对侧（H）减少46%；而HI侧脑组织胞浆中细胞色素C的含量在HI后1h已明显增加，在HI后14h增加更明显。免疫组化结果显示大脑皮层细胞色素C阳性细胞数在HI后1h为8.4±1.8个/高倍视野，明显高于正常对照的1.5±0.8个/高倍视野（P<0.01），并随HI后恢复时间的延长阳性细胞逐渐增加，在HI后14h达到峰值（29.0±5.2个/高倍视野）；而TUNEL阳性细胞数在HI后1h为14±3个/高倍视野，明显高于正常对照的1.5±0.8个/高倍视野（P<0.01），在HI后24h达到峰值（286±86个/高倍视野）。荧光染色发现细胞色素C释放与活性半胱天冬酶-3仅在HI后早期同时染色，并且阳性细胞表现为核浓缩，随HI后恢复时间的延长，细胞色素C的阳性细胞明显少于活性半胱天冬酶-3的阳性细胞；细胞色素C与TUNEL双染色显示仅细胞色素C弱阳性的细胞表现为TUNEL强阳性和核浓缩。
结论缺氧缺血后细胞色素C的释放是凋亡的早期改变之一。