【摘 要】
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目的 构建高致病性禽流感病毒H5N1亚型核蛋白（NP）的真核表达载体,并在哺乳动物细胞中表达、鉴定其编码重组蛋白NP.方法 采用RT-PCR法扩增NP基因,T-A克隆到pMD18-T载体中构建pMD
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目的 构建高致病性禽流感病毒H5N1亚型核蛋白（NP）的真核表达载体,并在哺乳动物细胞中表达、鉴定其编码重组蛋白NP.方法 采用RT-PCR法扩增NP基因,T-A克隆到pMD18-T载体中构建pMD18-T-NP质粒.经PCR、双酶切鉴定后,双酶切阳性质粒与pXJ40-HA载体,电泳后胶回收,连接目的片段,构建pXJ40-HA-NP质粒,经PCR、双酶切、测序分析鉴定为阳性的质粒即为NP蛋白的真核表达载体.转染293T细胞后,采用免疫印迹法（Western blot）鉴定重组NP蛋白的表达.结果 成功构建
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