【摘 要】
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目的:在仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)中高效表达糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚定修饰的Met-RANTES融合蛋白,以研制新型免疫抑制分子GPI锚固型Met-RANTES。方法:构建真核表达载体PEF/GPI-Me
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(30400250)
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目的:在仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)中高效表达糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚定修饰的Met-RANTES融合蛋白,以研制新型免疫抑制分子GPI锚固型Met-RANTES。方法:构建真核表达载体PEF/GPI-Met-RANTES,利用电转化法转染CHO-DHFR-细胞,氨甲喋呤(MTX)筛选抗性克隆。用流式细胞仪、细胞免疫荧光和免疫金标记电镜检测细胞膜上GPI锚固型Met-RANTES融合蛋白的表达情况。结果:构建了阅读框完整的GPI锚固型Met-RANTES嵌合分子,经测序是正确的,并在CHO-DHFR-细胞膜上稳定表达。结论:在CHO细胞表面高效表达GPI修饰的Met-RANTES融合蛋白,GPI锚固型Met-RANTES分子有可能作为新型的免疫抑制剂用于器官移植中,抑制移植排斥反应。
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