【摘 要】
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为开发准确、灵敏的苹果锈果类病毒（Apple scar skin viroid,ASSVd）RT-PCR检测方法,以田间染病苹果组织为试材,提取高质量总RNA为模板,在常规RT-PCR检测体系中引入苹果线粒体na
【基金项目】
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国家苹果现代产业技术体系（CARS-28）, 河北省高等学校科学技术研究项目“苹果褪绿叶斑病毒运动相关寄主因子研究”（YQ2014023）, 河北省青年拔尖人才计划
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为开发准确、灵敏的苹果锈果类病毒（Apple scar skin viroid,ASSVd）RT-PCR检测方法,以田间染病苹果组织为试材,提取高质量总RNA为模板,在常规RT-PCR检测体系中引入苹果线粒体nad5基因作为内标基因,对RT-PCR反应体系和程序进行优化,并测定其灵敏度和稳定性,最后利用优化的检测体系确定苹果果实着色期最佳检测部位。结果表明：以RNA提取改良法提取总RNA为模板合成cDNA后,进行PCR扩增,优化后的PCR体系（25μL）中cDNA模板2μL、ASSVd（20pmol/μL
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