单核细胞增生李斯特菌ladR基因在两种原核表达载体中的克隆表达及纯化分析

来源 :现代食品科技 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wxiaof

【摘要】

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利用特异性引物扩增ladR基因序列,分别构建单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes)ladR基因的两种原核表达载体,即含有6个His标签的pET-28a-ladR表达载体和含有GST标

【作者】

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陈月桃陈谋通吴清平张菊梅程健恒孙奇凡

【机构】

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广东省微生物研究所,华南农业大学食品学院

【出处】

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现代食品科技

【发表日期】

：

2019年10期

【关键词】

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单增李斯特菌 LadR蛋白原核表达蛋白纯化

【基金项目】

：

广东省基础与应用基础研究项目(2017A030313173);国家自然科学基金资助项目(31701718);广州市珠江科技新星专项资助项目(201710010018);广东省科学院创新驱动发展能力专项项目(2017GDASCX-0201)

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利用特异性引物扩增ladR基因序列,分别构建单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes)ladR基因的两种原核表达载体,即含有6个His标签的pET-28a-ladR表达载体和含有GST标签的pGEX-4T-ladR表达载体。通过诱导时间、温度和浓度优化两种表达载体的蛋白表达条件,比较分析两种表达载体的LadR蛋白可溶性表达水平,利用Western-Blot进行LadR蛋白表达验证。本研究成功构建了pET-28a-ladR和pGEX-4T-ladR表达载体,在大肠杆菌BL21中分别

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