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目的
评价重组诺如病毒(Norovirus, NoV)GⅡ.17基因型VP1蛋白类病毒颗粒(virus like particle, VLP)的免疫学效果。
方法对纯化后的GⅡ.17型VP1 VLP进行SDS-PAGE和Western blot鉴定,利用透射电镜和动态光散射对VLP大小、形态及粒径分布情况等进行检测,将GⅡ.17型VP1 VLP与含铝佐剂吸附后免疫BALB/c小鼠,利用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)和组织血型抗原(histo-blood group antigen, HBGA)-VLP阻断试验检测小鼠血清特异性抗体水平和阻断抗体活性,并分析GⅡ.17型VP1 VLP蛋白免疫后血清与GⅠ.1和GⅡ.4 VP1 VLP蛋白的交叉反应和交叉阻断情况。
结果纯化后的重组NoV GⅡ.17型VP1 VLP蛋白纯度大于90%,Western blot检测到特异性条带。VLP直径在30~50 nm之间,形态良好,分布均匀,颗粒形态与天然病毒类似。免疫小鼠血清可检测到高滴度特异性抗体,且对GⅠ.1和GⅡ.4型VP1 VLP具有一定程度的交叉反应,但是无交叉阻断作用。
结论应用含铝佐剂的GⅡ.17型VP1 VLP免疫小鼠,可诱发较高滴度的HBGA阻断抗体,可作为诺如病毒疫苗的候选靶抗原。