【摘 要】
：
目的 通过原核表达系统可溶性表达重组D蛋白,为多糖结合疫苗的制备提供蛋白载体.方法 将Hib CMCC株基因组DNA中去除信号肽的hpd基因片段插入pET43.1a表达质粒,转化入感受态大肠埃希菌BL21 (DE3),IPTG诱导表达.表达的重组蛋白,经过硫酸铵沉淀和DEAE阴离子交换柱层析纯化后,用Western Blot的方法鉴定其免疫反应原性.结果 表达的重组蛋白以可溶性形式存在,表达量约占
【机 构】
：
650118昆明,中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所生物制品五室,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所肝炎室,北京出入境检验检疫局保健中心,650118昆明,中国医学科学院北京协和医学院医学
论文部分内容阅读
目的 通过原核表达系统可溶性表达重组D蛋白,为多糖结合疫苗的制备提供蛋白载体.方法 将Hib CMCC株基因组DNA中去除信号肽的hpd基因片段插入pET43.1a表达质粒,转化入感受态大肠埃希菌BL21 (DE3),IPTG诱导表达.表达的重组蛋白,经过硫酸铵沉淀和DEAE阴离子交换柱层析纯化后,用Western Blot的方法鉴定其免疫反应原性.结果 表达的重组蛋白以可溶性形式存在,表达量约占菌株总蛋白的44％,经过初步纯化后的重组蛋白可以和Hib抗血清发生特异性反应.结论 成功构建了D蛋白重组表达质粒,并在原核细胞中以可溶性形式表达出具有良好免疫反应原性的D蛋白。
其他文献
流感疫苗接种始于20世纪40年代,在人群中长期和广泛的接种数据表明流感疫苗接种是防控流感最有效的手段.传统疫苗的存在形式包含全病毒灭活疫苗、裂解疫苗和亚单位疫苗.它们存在的局限性主要包括:(1)依赖于鸡胚生产,耗时较长;(2)不良反应较大;(3)匹配性依赖:若疫苗株与流行株不相匹配,会造成免疫逃脱,严重影响人群免疫效果;(4)监测干扰:机体会产生针对于病毒内部蛋白(如NP)的特异性抗体,所以全病毒
目的 比较BALB/c-E6E7细胞(含HPV16 E6E7基因的BALB/c 3T3细胞)转化实验与BALB/c 3T3细胞转化实验对三种多环芳烃致癌性的评价能力.方法 应用已优化的BALB/c-E6E7细胞转化实验与Ⅱ阶段BALB/c3T3细胞转化实验检测三种多环芳烃的致癌性和促癌性.结果 两种细胞转化实验对三种多环芳烃致癌性和促癌性的评价结果一致,且符合IARC对其致癌性的分类标准.BALB
固有免疫在机体抵御HIV-1感染过程中发挥重要作用.载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样蛋白(apolipoprotein B mRNA-editing enzyme catalytic polypeptide protein,APOBEC)家族的成员APOBEC3G(A3G)可以通过胞嘧啶脱氨机制抑制HIV-1的复制,发挥固有免疫的作用;病毒感染因子(virus infectivity fact
腺病毒是普遍存在的双链DNA病毒，感染人的腺病毒分为A—G7个种，包括50多个型别，引起咽炎，肺炎，胃肠炎，出血性膀胱炎，角结膜炎等疾病。通过对人腺病毒的研究发现，其基因组携带5个早期转录单位（E1A，E1B，E2，E3，E4），
目的 了解湖南地区流行性腮腺炎(流腮)病毒流行株基因特性及变异情况.方法 采用Vero/SLAM细胞分离流行性腮腺炎病毒,通过小疏水蛋白基因(SH基因)的序列分析,与其他基因型参考株进行同源性比较,构建亲缘进化树.结果 从2011年湖南多地区上送的16份咽拭子标本中分离到腮腺炎病毒4株,通过基因特性分析,4株毒株均属于F基因型.结论 2011年湖南省流行性腮腺炎的流行株为F基因型,未发现基因型变异
目的 探讨广东地区HIV/AIDS病例的死亡原因.方法 对345例HIV/AIDS住院死亡病例进行回顾性分析.结果 (1) 2001年1月至2011年12月某医院HIV/AIDS住院患者3406例,死亡345例,病死率10.13％.自2005年实行免费抗病毒治疗以来,病死率较前下降.CD4+T淋巴细胞计数＜ 200个/μl者病死率为14.61％(299/2046),与≥200个/μl者之间差异有统
目的 表达和纯化一种新的来自于超耐热菌(thermococcus kodakarensis) KOD1的单链DNA结合蛋白(缩写为kod-ssb),并探讨其对DNA、cDNA合成的影响.方法 采用Transrtta(DE3)表达kod-ssb,用镍柱亲和层析纯化,经SDS-PAGE分析检测表达纯化后的kod-ssb.使用PCR及qRT/qPCR检测kod-ssb对DNA、cDNA合成的影响.结果
我刊图、表（包括图表题、图表内容、图表注解）一律用中、英文双语表达的方法，但有些来稿往往只用中文表达，而未同时出示英文，给审、修稿带来一定困难，尤其是推迟了稿件的登刊时间，希广大作者注意这个问题。
目的 建立双抗体夹心ELISA法定量检测重组人干扰素αlb的方法。方法筛选具有不同抗原结合位点的抗重组人干扰素αlb单克隆抗体，分别作为包被抗体和辣根过氧化酶标记抗体，建立双抗体夹心ELISA法定量检测不同批次重组人干扰索仅1b含量，评价该法的检出限、精确度、重复性、特异性。结果所建立的ELISA最低检出限为10ng／ml，检测线性范围10—100ng／ml，R2=0．992，测定值与实际值偏差〉
目的 研究青岛地区乙型肝炎病毒(HBV)基因型的分布以及不同基因型HBV病毒的复制能力与YMDD自然变异情况,探讨其临床意义.方法 对144例HBV-DNA阳性患者采用荧光定量PCR方法检测HBV基因分型及YMDD自然变异,并进行统计学分析.结果 114例患者中C型130例(90.3％),B型12例(8.3％),非B非C型2例(1.4％)；有33例(22.9％)存在自然YMDD变异,其中YVDD阳