小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞电穿孔转染条件的建立和验证

来源 :中国实验动物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:suenger
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目的筛选并验证RAW264.7细胞中电穿孔转染TRIB3过表达质粒和TRIB3 siRNA的条件,建立适用于RAW264.7细胞的最佳电穿孔转染方案。方法通过改变脉冲电压、脉冲时长和质粒浓度等条件,将载体为pCMV6-Entry的TRIB3过表达质粒和TRIB3 siRNA转入RAW264.7细胞,24 h后相差显微镜观察细胞形态,CCK-8法检测细胞存活率,72 h后Western Blot法检测TRIB3蛋白表达以验证目的基因表达改变情况。结果(1)以不同脉冲电压转染时,110和120 mV组细胞形态
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