【摘 要】
：
目的 构建、鉴定靶向过氧化物酶体增殖子活化受体-γ(PPAR-γ)基因的siRNA腺病毒载体.方法 遵循siRNA片段的设计原则,依据GenBank中PPARγ基因(AF013266)的序列,设计3个特异
【机 构】
：
郑州大学第一附属医院骨科河南省高等临床医学重点学科开放实验室,450052郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室;郑州大学基础医学院微生物免疫教研室;
论文部分内容阅读
目的 构建、鉴定靶向过氧化物酶体增殖子活化受体-γ(PPAR-γ)基因的siRNA腺病毒载体.方法 遵循siRNA片段的设计原则,依据GenBank中PPARγ基因(AF013266)的序列,设计3个特异性靶序列(36～54位、73～91位和404～422位);体外合成对应发卡样DNA片段,经退火后,将其克入pSIREN-Shuttle载体,通过PCR和I-Ceu I和PI-Sce I酶切鉴定后,再亚克隆入pAdeno-X腺病毒载体.对插入序列进行DNA序列分析.结果 发卡样siRNA单链DNA寡核苷酸退火后,电泳可见明亮靶条带;PCR扩增和酶切鉴定得到阳性克隆pSIREN-Shuttle-siPPARγ-1、pSIREN-Shuttle-siPPARγ-2和pSIREN-Shuttle-siPPARγ-3.亚克隆重组腺病毒载体pAdeno-X siPPARγ1、pAdeno-X-siPPART-2和pAdeno-X-siPPARγ-3,经测序鉴定证实插入DNA序列与设计完全一致.结论 成功构建3个靶向PPARγ基因的siRNA重组腺病毒载体,为进一步的基因治疗研究奠定了实验基础.
其他文献
我国一直对能源发展高度重视。"十三五"时期,我国能源消费增长换档减速,保供压力明显缓解,供需相对宽松,能源发展进入新阶段。在供求关系缓和的同时,结构性、体制机制性等深
绿色技术是减轻环境污染或减少原材料和自然资源使用的技术、工艺或产品的总称,是落实21世纪可持续发展战略．是实现国民经济持续快速发展的有效途径。液压技术作为重要的机械
该文从挂篮荷载计算、施工流程、支座及临时固结施工、挂篮安装及试验、合拢段施工、模板制作安装、钢筋安装、混凝土的浇筑及养生、测量监控等方面人手,介绍了S226海滨大桥
该文从挂篮荷载计算、施工流程、支座及临时固结施工、挂篮安装及试验、合拢段施工、模板制作安装、钢筋安装、混凝土的浇筑及养生、测量监控等方面人手,介绍了S226海滨大桥
HZSM-5分子筛作为一种重要的固体酸催化剂被应用于甲醇制低碳烯烃(MTO)反应中,反应过程中积炭的生成是催化剂活性下降的主要原因之一.我们通过设定反应后失活催化剂不同的再
该文从挂篮荷载计算、施工流程、支座及临时固结施工、挂篮安装及试验、合拢段施工、模板制作安装、钢筋安装、混凝土的浇筑及养生、测量监控等方面人手,介绍了S226海滨大桥
针对交流电动机启动电流过大、频繁启动易损坏甚至被烧毁以及电动机保护方面的问题,以先进的80C196KC单片机为主控制,其他集成芯片和可控硅为辅助,采用汇编语言研制出微机电
目的 探讨TNF-α-863C/A基因多态性对NF-kB p65-p50和p50-p50活化的调控,以及在脓毒症发病中的作用及机制.方法 选择已知TNF-α-863C/A基因多态性的脓毒症患者30例,采集静脉
柴油机的柱塞偶件加工精度较高,柱塞和柱塞套筒之间的径向配合间隙仅为1.5～2.5μm。试验表明,对于直列式喷油泵,由正常工作到柱塞在柱塞套筒内卡滞的平均可工作时间为1487h,
该文从挂篮荷载计算、施工流程、支座及临时固结施工、挂篮安装及试验、合拢段施工、模板制作安装、钢筋安装、混凝土的浇筑及养生、测量监控等方面人手,介绍了S226海滨大桥