牛流行热病毒G1抗原表位基因在大肠杆菌中的表达、纯化及抗原性鉴定

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【摘要】

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从包含牛流行热病毒G蛋白基因的质粒pMD-G中克隆G1抗原表位区基因,与表达载体pGEX-4T-1连接,成功构建重组质粒pGEX-G1.重组质粒转化BL21（DE3）,以IPTG进行诱导,并确定了最佳表达

【作者】

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郑福英蔺国珍邱昌庆

【机构】

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中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室

【出处】

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微生物学报

【发表日期】

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2007年3期

【关键词】

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牛流行热病毒 G1抗原表位基因大肠杆菌表达鉴定 bovine ephemeral fever virus epitope-G1 gene Escher

【基金项目】

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国家奶业重大专项基金资助（2002BA518A04）

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从包含牛流行热病毒G蛋白基因的质粒pMD-G中克隆G1抗原表位区基因,与表达载体pGEX-4T-1连接,成功构建重组质粒pGEX-G1.重组质粒转化BL21（DE3）,以IPTG进行诱导,并确定了最佳表达条件的IFTG浓度为0.1mmol/L、反应温度为16℃、诱导时间为18h.可溶性表达的目的蛋白经Glutathione Sepharose TM^4B介质纯化,纯度达80%;以包涵体形式存在的重组蛋白以2%的脱氧胆酸钠洗涤、0.5%的N-十二烷基肌氨酸钠溶解、透析复性、Glutathione Sepha

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