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建立了一种快速、简便的分离木瓜蛋白酶的方法。尼龙膜经壳聚糖改性后，以金属镍离子Ni^2＋为配基制备了一种新型的蛋白质分离材料，并将该亲和膜应用于木瓜蛋白酶的分离纯化，在对洗脱液、上样速度、洗脱速度、洗脱液的pH值和洗脱液的离子强度进行优化的基础上，成功地分离纯化出木瓜蛋白酶，纯化倍数为20．59倍。