【摘 要】
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目的:为探明羧基端疏水区对百日咳毒素S1亚单位分泌性的影响,试图构建缺失羧基端疏水区的S1亚单位.方法:应用PCR技术构建了6种不同信号序列修饰的缺失羧基端疏水区的S1亚单位
【机 构】
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哈尔滨医科大学病生教研室,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,哈尔滨医科大学病理生理教研室
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目的:为探明羧基端疏水区对百日咳毒素S1亚单位分泌性的影响,试图构建缺失羧基端疏水区的S1亚单位.方法:应用PCR技术构建了6种不同信号序列修饰的缺失羧基端疏水区的S1亚单位编码基因,并使用重组杆状病毒(rBV)技术实现了这些缺失S1亚单位(tS1)在昆虫细胞中的高水平表达.结果:这些缺失S1亚单位的表达量为每万个昆虫细胞1.01～2.25 μg.细菌信号肽和流感病毒HA信号肽均能完整表达和正确剪切,但HA信号肽在昆虫细胞中的处理效率更高.结论:tS1亚单位缺失羧基端疏水区后在昆虫细胞中的表达量明显提高,这些tS1亚单位的异源性表达是由于信号肽剪切不全所导致,tS1分子表观分子量的漂移并不意味着信号肽剪切不正确.
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