【摘 要】
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通过提取细胞核,以超声波剪切染色质,利用酸提取和分段盐析等提取纯化核心组蛋白,将其固定于Sepharose-4B上制备核心组蛋白生物色谱柱。以细胞核蛋白为复杂组分的考察对象,测
【基金项目】
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暨南大学本科生科技创新工程项目(No.cx11113);暨南大学自然科学基金(No.109057;640073)
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通过提取细胞核,以超声波剪切染色质,利用酸提取和分段盐析等提取纯化核心组蛋白,将其固定于Sepharose-4B上制备核心组蛋白生物色谱柱。以细胞核蛋白为复杂组分的考察对象,测定该色谱柱在筛选相互作用蛋白中的性能,筛选出组蛋白相互作用蛋白。对核蛋白、穿透色谱柱蛋白、洗脱蛋白的非变性SDS-PAGE比较表明,核心组蛋白色谱柱对核蛋白复杂组分的保留行为存在差异,至少能筛选出9种组蛋白作用蛋白。固定化核心组蛋白能够特异性、选择性的与对核心组蛋白有活性的物质结合,可以排除大量非作用杂质成分的干扰,因此可应用于以组蛋白为靶分子的蛋白质等活性成分或药物的筛选。
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