【摘 要】
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目的建立HTLV-I前病毒tax基因的荧光定量PCR检测方法。方法根据HTLV-I tax基因序列设计引物,将PCR克隆的tax片段链接入质粒载体,经筛选鉴定后,以含有目的片断的质粒为阳性模
【机 构】
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上海市血液中心,上海交通大学医学院附属新华医院血液科
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目的建立HTLV-I前病毒tax基因的荧光定量PCR检测方法。方法根据HTLV-I tax基因序列设计引物,将PCR克隆的tax片段链接入质粒载体,经筛选鉴定后,以含有目的片断的质粒为阳性模板建立实时荧光定量检测方法。结果扩增体系的敏感度可达10拷贝/反应。模板浓度在105~101拷贝/反应时,模板浓度与循环阈值(Ct)之间相关性良好,相关系数r=-0.9987,且模板浓度相同的反应管之间具有良好的重复性和稳定性。结论SYBRGreen荧光定量PCR检测HTLV-I前病毒tax基因方法具有简便、快速和灵敏度高等优点,可能在疾病诊断、监测以及血液筛查中具有一定的应用前景。
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