【摘 要】
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目的探索利用天然抗角蛋白自身抗体(AKautoAb)淘筛噬菌体递呈的随机肽库,获得在体内具有功能活性的角蛋白模拟表位方法。方法用角蛋白亲和层析柱从正常人混合血清中分离并纯
【机 构】
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第四军医大学西京医院皮肤科; 第四军医大学微生物学教研室; 第四军医大学微生物学教研室 710032西安; 710032西安; 710032;
【基金项目】
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国家1035课题(96-901-01-38)
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目的探索利用天然抗角蛋白自身抗体(AKautoAb)淘筛噬菌体递呈的随机肽库,获得在体内具有功能活性的角蛋白模拟表位方法。方法用角蛋白亲和层析柱从正常人混合血清中分离并纯化AKautoAb,然后进行生物素标记;用生物素化的AKautoAb对噬菌体递呈的随机15肽库进行3轮淘洗并进行ELISA检测;挑取23个阳性克隆进行DNA测序,分析所获数据并进行竞争实验。结果DNA测序分析表明,AKautoAb特异识别3个抗原表位区:SLSPMPTTNRR、PPLIPIPLRTM和TTPRPPMRIMLPRIT,其中SLSPMPTTNRR可能含有优势表位;携有这些短肽的噬菌体可与AKautoAb特异结合,角蛋白可阻断这种特异的结合反应。结论利用噬菌体随机肽库技术成功地获得了AKautoAb所识别的角蛋白模拟表位。
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