评价β-抑制蛋白-1在盐酸戊乙奎醚抑制内毒素诱导人肺微血管内皮细胞NF-κB激活中的作用。
方法将人肺微血管内皮细胞以1×105个/ml的密度接种于6孔板(2 ml/孔)或培养瓶(4 ml/瓶)中，采用随机数字表法，将其分为5组(n＝20)：空质粒转染组(C组)、脂多糖(LPS)＋空质粒转染组(LPS组)、盐酸戊乙奎醚＋LPS＋空质粒转染组(P＋LPS组)、LPS＋含β-抑制蛋白-1短发卡RNA(shRNA)的质粒转染组(LPS＋shRNA组)和盐酸戊乙奎醚＋LPS＋含β-抑制蛋白-1 shRNA的质粒转染组(P＋LPS＋shRNA组)。以空质粒1.5 μg或含15 nmol/L β-抑制蛋白-1 shRNA的质粒转染细胞，孵育24 h时加入终浓度为2 μg/ml的盐酸戊乙奎醚，孵育1 h时加入终浓度为0.1 μg/ml的LPS，孵育1 h，进行下述指标的测定。取上清液，测定乳酸脱氢酶(LDH)活性，收集细胞悬液，测定血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)表达、NF-κB活性、NF-κB抑制蛋白(I-κB)及β-抑制蛋白-1的表达水平。
结果与C组比较，LPS组和LPS＋shRNA组上清液LDH活性升高，VCAM-1表达上调，NF-κB活性升高，I-κB和β-抑制蛋白-1的表达下调(P<0.01)；与LPS组比较，P＋LPS组上清液LDH活性降低，VCAM-1表达下调，NF-κB活性降低，I-κB和β-抑制蛋白-1的表达上调(P<0.05或0.01)，P＋LPS＋shRNA组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)；与P＋LPS组比较，P＋LPS＋shRNA组上清液LDH活性升高，VCAM-1表达上调，NF-κB活性升高，I-κB和β-抑制蛋白-1的表达下调(P<0.05或0.01)。
结论盐酸戊乙奎醚完全通过上调β-抑制蛋白-1表达抑制内毒素诱导人肺微血管内皮细胞NF-κB激活。