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[摘要] 目的 建立复方醋酸氟轻松乳膏中尿囊素和冰片的定量方法。 方法 尿囊素采用Intersil ODS-3 C18柱（250mm×4.6mm，5μm），流动相为甲醇：水（2：98），检测波长为210nm，流速为1.0mL/min，外标法计算。冰片以水杨酸甲酯为内标物，采用气相色谱法，DB-WAX毛细管色谱柱（30m×0.53mm×1.0μm），柱温130℃，进样口温度220℃，FID检测器，检测器温度为280℃。 结果 尿囊素和冰片的线性范围分别为0.05015～1.003 mg/mL和0.4728～4.728mg/mL，回归方程分别为Y=130310X+1418.5（r=0.9998）和Y=1.2213X-0.0082（r=1.0000）。尿囊素和冰片的平均回收率分别为102.12%（RSD=0.59%）和100.25%（RSD=0.60%）。 结论 本方法简便、快捷，灵敏度高，结果准确，可用于本制剂的质量控制。
[关键词] 复方醋酸氟轻松乳膏；尿囊素；冰片；高效液相色谱法；气相色谱法
[中图分类号] R927.11 [文献标识码] B [文章编号] 2095-0616（2015）13-33-04
[Abstract] Objective To establish a method for the determination of allantoin and borneol in compound fluocinonide cream. Methods Allantoin was detected by Intersil ODS-3 C18 column（250mm×4.6mm， 5μm） with methanol-water（2：98） as the mobile phase at the flow rate of 1.0mL/min. The detection wavelength was at 210 nm. It was calculated by the external standard method. Borneol. Methyl salicylate was selected as internal standard. Gas chromatography was adopted. The column was DB-WAX capillary column （30m×0.53mm×1.0μm） and column temperature was 130℃. The injector temperature was 220℃ and the detector was FID whose temperature was 280℃. Results The linear range of allantoin and borneol were 0.05015 to 1.003mg/mL and 0.4728 to 4.728mg/mL. Regression equations were Y=130310X+1418.5（r=0.9998） and Y=1.2213X-0.0082（r=1.0000） respectively. The average recovery of allantoin and borneol were 102.12%（RSD=0.59%）and 100.25%（RSD=0.60%）respectively. Conclusion The method is simple， rapid， sensitive， accurate and reliable which can be used for quality control of compound fluocinonide cream.
[Key words] Compound fluocinonide cream； Allantoin； Borneol； High Performance Liquid Chromatography； Gas chromatography
复方醋酸氟轻松乳膏为《中国人民解放军医疗机构制剂规范》[1]（2002）版收载的品种，用途为止痒抗过敏，用于急性、亚急性、慢性湿疹，皮肤瘙痒症，过敏性皮炎。本品种为复方制剂，处方中有醋酸氟轻松、氯霉素、冰片、氧化锌、尿囊素五个成分，但现标准中只有醋酸氟轻松和氯霉素的含量测定。为更好的控制该品种的质量，根据军队医疗机构制剂标准提高计划课题2013年度检查评估会有关事项，本次针对尿囊素、冰片进行研究，建立了含量测定方法并进行方法学验证。方法专属性强，灵敏度高，重复性好，从而可以更好地有效地控制醋酸氟轻松乳膏的内在质量。
1 材料与方法
LC-2010A高效液相色谱仪、DAD检测器（日本岛津有限公司），Aglient 7890气相色谱仪、氢火焰离子化检测器（美国安捷伦科技有限公司）。
尿囊素对照品、冰片对照品及水杨酸甲酯对照品均购自中国食品药品检定研究院，批号分别为：11501-200202、110743-200905、110707-201112。复方醋酸氟轻松乳膏样品以及空白辅料来自沈阳军区总医院，样品批号分别为20130520、20130522。甲醇和乙酸乙酯均为色谱纯试剂。
2 尿囊素含量测定结果
参照文献报道[2-6]有关尿囊素的含量测定方法，确定采用高效液相色谱法，方法如下。
2.1 色谱条件
色谱柱：Intersil ODS-3 C18（250mm×4.6mm，5μm）。
流动相：甲醇：水（2：98）；检测波长：210nm；柱温：30℃；进样量：10μL。
理论板数按尿囊素计算为7095。
2.2 溶液的制备 2.2.1 对照品溶液 取尿囊素对照品10mg，精密称定，置50mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。
2.2.2 供试品溶液 取复方醋酸氟轻松乳膏1g，精密称定，置50mL量瓶中，加水适量，置80℃水浴中加热5min，振摇使溶解，放冷至室温，用水稀释至刻度，摇匀，至冰浴中冷却15min，取出，滤过，滤液放至室温，作为供试品溶液。
2.2.3 阴性溶液 取空白基质约1g，与样品同法处理，作为阴性溶液。
2.3 方法学考察
2.3.1 专属性 取对照品溶液、供试品溶液及阴性对照溶液，按上述色谱条件测定，记录色谱图，结果表明阴性溶液无干扰。见图1。
2.3.2 线性关系考察 精密称取尿囊素对照品配制成不同标准曲线浓度。精密量取上述供试液10?L，注入液相色谱仪，记录色谱图，以峰面积对浓度做线性回归，绘制标准曲线，尿囊素回归方程为Y=130310X+1418.5，r=0.9998，结果表明，尿囊素浓度在0.05015～1.003mg/mL，线性良好。
2.3.3 精密度试验 按上述色谱条件，精密吸取尿囊素对照品溶液10?l进样6次，记录色谱图，计算峰面积的RSD%（n=6），为0.05%。
2.3.4 稳定性试验 取重复性项下的供试品溶液分别于0、1、3、5、7、9、11、13、15、17、24h进样测定，记录色谱图，考察尿囊素峰面积RSD，室温下，样品溶液中尿囊素峰面积24h内基本稳定，RSD%为1.59%，满足测定要求。
2.3.5 重复性试验 取复方醋酸氟轻松乳膏（批号20130522）6份，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，按上述色谱条件进行测定，结果6份样品中尿囊素含量RSD为0.91%。
2.3.6 回收率试验 采用模拟回收实验。分别精密称取原料适量（相当于尿囊素8、10、12mg），置50mL的量瓶中，加入空白辅料1g，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，分别制得浓度为80%、100%、120%的供试品溶液。按上述色谱条件进行测定，计算回收率，结果表明低浓度溶液（80%）、中间浓度溶液（100%）、高浓度溶液（120%），各个样品中尿囊素的的回收率均在98.0%～103.0%，平均回收率102.12%，RSD为0.59%，满足测定要求。
2.4 讨论
考虑尿囊素的溶解性，能溶于热水，故选择用水作为溶剂，在80℃水浴中加热溶解。用水作为溶剂时，不同提取时间，含量有差异。经实验证明，5min的含量最高，10min后无明显变化，故选择水浴时间为5min。
实验发现，软膏基质对色谱柱有较大的损害，如果不除去基质，长时间进样后色谱峰的分离效果会变差，理论板数也会下降，考虑到冷冻可以除去基质，故将样品冷冻后滤过，放置到室温进行测定。
另外考察了不同厂家的色谱柱（Thermo BDS HYPERSIL C18，5μm 4.6mm×250mm）进行试验，选择不同的仪器（Waters2695高效液相色谱），结果均表明分离度良好，样品含量值较稳定，理论板数符合要求，说明方法耐用性良好。
3 冰片含量测定结果
参照《中国药典》2010年版一部[7-9]及文献报道[7-12]有关冰片的含量测定方法，确定采用气相色谱法，方法如下。
3.1 色谱条件
色谱柱：DB-WAX气相色谱柱（30m× 0.53mm× 1.0μm）
柱温130℃，进样口温度为220℃，检测器温度为280℃，氮气流速为2mL/min，氢气的流速为30mL/min，空气的流速为400mL/min。检测器为FID。理论板数按水杨酸甲酯计算应不低于2000，且冰片两个色谱峰与水杨酸甲酯峰分离度应符合要求。
3.2 溶液的制备
3.2.1 内标溶液 称取水杨酸甲酯对照品1.5g，置50mL量瓶中，加乙酸乙酯溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。
3.2.2 对照品溶液 取冰片对照品30mg，精密称定，置25mL量瓶中，加乙酸乙酯适量使溶解，精密量取内标溶液1mL，加乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀，即得。
3.2.3 供试品溶液 称取本品约2.0g，精密称定，置25mL量瓶中，精密量取内标溶液1mL，加乙酸乙酯适量超声振摇，使冰片溶解，加乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀，即得。
3.2.4 阴性溶液 称取处方量的空白基质约2.0g，置25mL量瓶中，加乙酸乙酯适量超声振摇，加乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀，即得。
3.3 方法学考察
3.3.1 专属性 精密量取上述对照品溶液、供试品溶液、内标溶液、乙酸乙酯、阴性溶液各1μL，分别注入气相色谱仪，记录色谱图，结果表明空白辅料不干扰样品的测定，内标溶液与冰片两个色谱峰有效分离。
3.3.2 线性关系考察 称取冰片对照品（含量98.0%）301.47mg，置25mL量瓶中，加乙酸乙酯溶解并稀释至刻度，摇匀，得浓度约12mg/mL的溶液，作为冰片对照品贮备液。分别精密量取冰片对照品贮备液1、2、2.5、5、10mL，分别置25mL量瓶中，分别精密量取内标溶液1mL，用乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀，作为线性供试品溶液。精密量取上述线性供试液各1μL，注入气相色谱仪，记录色谱图，按内标法以A对和/A内的比值为纵坐标，以冰片浓度为横坐标做线性回归，计算回归方程。冰片回归方程为：Y=1.2213X-0.0082，相关系数r=1.0000，结果表明，冰片浓度在0.4728～4.728mg/mL范围内成良好线性关系。
3.3.3 精密度试验 取含量测定用对照品溶液1μL进样，分别注入气相色谱仪中，连续进样6次，记录色谱图，计算峰面积的RSD%。采用内标法，A和/A内比值的平均值为1.4417，RSD%（n=6）为0.3%。 3.3.4 稳定性试验 取重复性项下的供试品溶液分别于0、2、4、6、10、14、20、24h，精密量取1μL，注入气相色谱仪，记录色谱图，考察溶液中冰片的含量，供试品溶液在24h内基本稳定，RSD%为0.25%。
3.3.5 重复性试验 取复方醋酸氟轻松乳膏（批号20130522）6份，按“3.2.3”项下方法制备供试品溶液，按上述色谱条件进行测定，结果6份样品中冰片含量RSD为1.1%。
3.3.6 回收率试验 称取六份空白基质约2.0g，分别置25mL量瓶中，再分别精密称取冰片对照品（含量98.0%）23.97、24.26、30.68、30.89、36.43、36.95mg，分别精密量取内标溶液1mL，加乙酸乙酯适量超声振摇，使冰片溶解，，放冷至室温，加乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀，取续滤液，即得。按上述色谱条件进行测定，计算回收率，结果表明低浓度溶液（80%）、中间浓度溶液（100%）、高浓度溶液（120%），各个样品中冰片回收率在99.17%～101.05%，平均回收率为100.25%，RSD%（n=6）为0.60%，表明该方法测定冰片方法回收率良好，满足测定要求。
3.4 讨论
考虑冰片的结构及溶解性，选择乙酸乙酯和乙醇作为溶剂，经实验，以乙醇为溶剂，冰片的峰面积之和小于以乙酸乙酯为溶剂的冰片峰面积，故选择乙酸乙酯为溶剂。人工合成的冰片是由龙脑和异龙脑组成，在建立的色谱条件下，冰片有两个峰，含量计算时，取两峰面积之和计算。另外考察了不同色谱柱HP-INNOWAX（30m×0.32mm×0.5μm）进行试验，当本方法色谱柱发生变化时，该条件下的复方醋酸氟轻松乳膏中冰片含量数据相对偏差均小于2.0%，证明此方法的耐用性良好。
4 小结
本实验方法简便、快捷，灵敏度高，结果准确。可用于复方醋酸氟轻松乳膏质量的有效控制。
[参考文献]
[1] 中国人民解放军总后勤部卫生部.中国人民解放军医疗机构制剂规范[S].北京：人民军医出版社：186-187.
[2] 熊丽，李金涛，干国平.HPLC法测定日本薯蓣中尿囊素的含量[J].中国药房，2012，23（19）：76-78.
[3] 龙凌云，李成立，文庆，等. HPLC法测定缩泉胶囊中尿囊素的含量[J].中国药师，2013，16（4）：514-516.
[4] 郑琴，胡鹏翼，龚莹莹，等.HPLC法测定不同产地山药饮片中尿囊素和腺苷的含量[J].江西中医学院学报，2013，25（3）：32-34.
[5] 徐志红，贾晓斌，陈磊垚.HPLC测定梓木草饮片中尿囊素的含量[J].中国实验方剂学杂志，2012，18（23）：112-114.
[6] 张志勤，李玫，朱昌辉，等.RP-HPLC法同时测定复方维A酸乳膏中尿囊素、维A酸、异维A酸和维生素E的含量[J].中国药房，2014，25（12）：1131-1133.
[7] 国家药典委员会编.中华人民共和国药典（一部）[S].北京：中国医药科技出版社，2010：136.
[8] 国家药典委员会编.中华人民共和国药典（一部）[S].北京：中国医药科技出版社，2010：557.
[9] 国家药典委员会编.中华人民共和国药典（一部）[S].北京：中国医药科技出版社，2010：930.
[10] 宋莉，黄艳，刘雪峰.气相色谱同时测定黑豆馏油软膏中桉油精和冰片的含量[J].安徽医药，2013，17（6）：958-959.
[11] 曾小平，陈新国，黄俊忠，等.GC法测定克痒敏醑中薄荷脑、冰片和水杨酸甲酯的含量[J].中药新药与临床药理，2014，25（1）：74-76.
[12] 陈筱瑜，叶桦珍，宋洪涛.气相色谱法测定复方紫黄烧伤凝胶剂中冰片含量[J].福建中医药，2013，44（1）：49-50.
（收稿日期：2015-04-15）
[关键词] 复方醋酸氟轻松乳膏；尿囊素；冰片；高效液相色谱法；气相色谱法
[中图分类号] R927.11 [文献标识码] B [文章编号] 2095-0616（2015）13-33-04
[Abstract] Objective To establish a method for the determination of allantoin and borneol in compound fluocinonide cream. Methods Allantoin was detected by Intersil ODS-3 C18 column（250mm×4.6mm， 5μm） with methanol-water（2：98） as the mobile phase at the flow rate of 1.0mL/min. The detection wavelength was at 210 nm. It was calculated by the external standard method. Borneol. Methyl salicylate was selected as internal standard. Gas chromatography was adopted. The column was DB-WAX capillary column （30m×0.53mm×1.0μm） and column temperature was 130℃. The injector temperature was 220℃ and the detector was FID whose temperature was 280℃. Results The linear range of allantoin and borneol were 0.05015 to 1.003mg/mL and 0.4728 to 4.728mg/mL. Regression equations were Y=130310X+1418.5（r=0.9998） and Y=1.2213X-0.0082（r=1.0000） respectively. The average recovery of allantoin and borneol were 102.12%（RSD=0.59%）and 100.25%（RSD=0.60%）respectively. Conclusion The method is simple， rapid， sensitive， accurate and reliable which can be used for quality control of compound fluocinonide cream.
[Key words] Compound fluocinonide cream； Allantoin； Borneol； High Performance Liquid Chromatography； Gas chromatography
复方醋酸氟轻松乳膏为《中国人民解放军医疗机构制剂规范》[1]（2002）版收载的品种，用途为止痒抗过敏，用于急性、亚急性、慢性湿疹，皮肤瘙痒症，过敏性皮炎。本品种为复方制剂，处方中有醋酸氟轻松、氯霉素、冰片、氧化锌、尿囊素五个成分，但现标准中只有醋酸氟轻松和氯霉素的含量测定。为更好的控制该品种的质量，根据军队医疗机构制剂标准提高计划课题2013年度检查评估会有关事项，本次针对尿囊素、冰片进行研究，建立了含量测定方法并进行方法学验证。方法专属性强，灵敏度高，重复性好，从而可以更好地有效地控制醋酸氟轻松乳膏的内在质量。
1 材料与方法
LC-2010A高效液相色谱仪、DAD检测器（日本岛津有限公司），Aglient 7890气相色谱仪、氢火焰离子化检测器（美国安捷伦科技有限公司）。
尿囊素对照品、冰片对照品及水杨酸甲酯对照品均购自中国食品药品检定研究院，批号分别为：11501-200202、110743-200905、110707-201112。复方醋酸氟轻松乳膏样品以及空白辅料来自沈阳军区总医院，样品批号分别为20130520、20130522。甲醇和乙酸乙酯均为色谱纯试剂。
2 尿囊素含量测定结果
参照文献报道[2-6]有关尿囊素的含量测定方法，确定采用高效液相色谱法，方法如下。
2.1 色谱条件
色谱柱：Intersil ODS-3 C18（250mm×4.6mm，5μm）。
流动相：甲醇：水（2：98）；检测波长：210nm；柱温：30℃；进样量：10μL。
理论板数按尿囊素计算为7095。
2.2 溶液的制备 2.2.1 对照品溶液 取尿囊素对照品10mg，精密称定，置50mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。
2.2.2 供试品溶液 取复方醋酸氟轻松乳膏1g，精密称定，置50mL量瓶中，加水适量，置80℃水浴中加热5min，振摇使溶解，放冷至室温，用水稀释至刻度，摇匀，至冰浴中冷却15min，取出，滤过，滤液放至室温，作为供试品溶液。
2.2.3 阴性溶液 取空白基质约1g，与样品同法处理，作为阴性溶液。
2.3 方法学考察
2.3.1 专属性 取对照品溶液、供试品溶液及阴性对照溶液，按上述色谱条件测定，记录色谱图，结果表明阴性溶液无干扰。见图1。
2.3.2 线性关系考察 精密称取尿囊素对照品配制成不同标准曲线浓度。精密量取上述供试液10?L，注入液相色谱仪，记录色谱图，以峰面积对浓度做线性回归，绘制标准曲线，尿囊素回归方程为Y=130310X+1418.5，r=0.9998，结果表明，尿囊素浓度在0.05015～1.003mg/mL，线性良好。
2.3.3 精密度试验 按上述色谱条件，精密吸取尿囊素对照品溶液10?l进样6次，记录色谱图，计算峰面积的RSD%（n=6），为0.05%。
2.3.4 稳定性试验 取重复性项下的供试品溶液分别于0、1、3、5、7、9、11、13、15、17、24h进样测定，记录色谱图，考察尿囊素峰面积RSD，室温下，样品溶液中尿囊素峰面积24h内基本稳定，RSD%为1.59%，满足测定要求。
2.3.5 重复性试验 取复方醋酸氟轻松乳膏（批号20130522）6份，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，按上述色谱条件进行测定，结果6份样品中尿囊素含量RSD为0.91%。
2.3.6 回收率试验 采用模拟回收实验。分别精密称取原料适量（相当于尿囊素8、10、12mg），置50mL的量瓶中，加入空白辅料1g，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，分别制得浓度为80%、100%、120%的供试品溶液。按上述色谱条件进行测定，计算回收率，结果表明低浓度溶液（80%）、中间浓度溶液（100%）、高浓度溶液（120%），各个样品中尿囊素的的回收率均在98.0%～103.0%，平均回收率102.12%，RSD为0.59%，满足测定要求。
2.4 讨论
考虑尿囊素的溶解性，能溶于热水，故选择用水作为溶剂，在80℃水浴中加热溶解。用水作为溶剂时，不同提取时间，含量有差异。经实验证明，5min的含量最高，10min后无明显变化，故选择水浴时间为5min。
实验发现，软膏基质对色谱柱有较大的损害，如果不除去基质，长时间进样后色谱峰的分离效果会变差，理论板数也会下降，考虑到冷冻可以除去基质，故将样品冷冻后滤过，放置到室温进行测定。
另外考察了不同厂家的色谱柱（Thermo BDS HYPERSIL C18，5μm 4.6mm×250mm）进行试验，选择不同的仪器（Waters2695高效液相色谱），结果均表明分离度良好，样品含量值较稳定，理论板数符合要求，说明方法耐用性良好。
3 冰片含量测定结果
参照《中国药典》2010年版一部[7-9]及文献报道[7-12]有关冰片的含量测定方法，确定采用气相色谱法，方法如下。
3.1 色谱条件
色谱柱：DB-WAX气相色谱柱（30m× 0.53mm× 1.0μm）
柱温130℃，进样口温度为220℃，检测器温度为280℃，氮气流速为2mL/min，氢气的流速为30mL/min，空气的流速为400mL/min。检测器为FID。理论板数按水杨酸甲酯计算应不低于2000，且冰片两个色谱峰与水杨酸甲酯峰分离度应符合要求。
3.2 溶液的制备
3.2.1 内标溶液 称取水杨酸甲酯对照品1.5g，置50mL量瓶中，加乙酸乙酯溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。
3.2.2 对照品溶液 取冰片对照品30mg，精密称定，置25mL量瓶中，加乙酸乙酯适量使溶解，精密量取内标溶液1mL，加乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀，即得。
3.2.3 供试品溶液 称取本品约2.0g，精密称定，置25mL量瓶中，精密量取内标溶液1mL，加乙酸乙酯适量超声振摇，使冰片溶解，加乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀，即得。
3.2.4 阴性溶液 称取处方量的空白基质约2.0g，置25mL量瓶中，加乙酸乙酯适量超声振摇，加乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀，即得。
3.3 方法学考察
3.3.1 专属性 精密量取上述对照品溶液、供试品溶液、内标溶液、乙酸乙酯、阴性溶液各1μL，分别注入气相色谱仪，记录色谱图，结果表明空白辅料不干扰样品的测定，内标溶液与冰片两个色谱峰有效分离。
3.3.2 线性关系考察 称取冰片对照品（含量98.0%）301.47mg，置25mL量瓶中，加乙酸乙酯溶解并稀释至刻度，摇匀，得浓度约12mg/mL的溶液，作为冰片对照品贮备液。分别精密量取冰片对照品贮备液1、2、2.5、5、10mL，分别置25mL量瓶中，分别精密量取内标溶液1mL，用乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀，作为线性供试品溶液。精密量取上述线性供试液各1μL，注入气相色谱仪，记录色谱图，按内标法以A对和/A内的比值为纵坐标，以冰片浓度为横坐标做线性回归，计算回归方程。冰片回归方程为：Y=1.2213X-0.0082，相关系数r=1.0000，结果表明，冰片浓度在0.4728～4.728mg/mL范围内成良好线性关系。
3.3.3 精密度试验 取含量测定用对照品溶液1μL进样，分别注入气相色谱仪中，连续进样6次，记录色谱图，计算峰面积的RSD%。采用内标法，A和/A内比值的平均值为1.4417，RSD%（n=6）为0.3%。 3.3.4 稳定性试验 取重复性项下的供试品溶液分别于0、2、4、6、10、14、20、24h，精密量取1μL，注入气相色谱仪，记录色谱图，考察溶液中冰片的含量，供试品溶液在24h内基本稳定，RSD%为0.25%。
3.3.5 重复性试验 取复方醋酸氟轻松乳膏（批号20130522）6份，按“3.2.3”项下方法制备供试品溶液，按上述色谱条件进行测定，结果6份样品中冰片含量RSD为1.1%。
3.3.6 回收率试验 称取六份空白基质约2.0g，分别置25mL量瓶中，再分别精密称取冰片对照品（含量98.0%）23.97、24.26、30.68、30.89、36.43、36.95mg，分别精密量取内标溶液1mL，加乙酸乙酯适量超声振摇，使冰片溶解，，放冷至室温，加乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀，取续滤液，即得。按上述色谱条件进行测定，计算回收率，结果表明低浓度溶液（80%）、中间浓度溶液（100%）、高浓度溶液（120%），各个样品中冰片回收率在99.17%～101.05%，平均回收率为100.25%，RSD%（n=6）为0.60%，表明该方法测定冰片方法回收率良好，满足测定要求。
3.4 讨论
考虑冰片的结构及溶解性，选择乙酸乙酯和乙醇作为溶剂，经实验，以乙醇为溶剂，冰片的峰面积之和小于以乙酸乙酯为溶剂的冰片峰面积，故选择乙酸乙酯为溶剂。人工合成的冰片是由龙脑和异龙脑组成，在建立的色谱条件下，冰片有两个峰，含量计算时，取两峰面积之和计算。另外考察了不同色谱柱HP-INNOWAX（30m×0.32mm×0.5μm）进行试验，当本方法色谱柱发生变化时，该条件下的复方醋酸氟轻松乳膏中冰片含量数据相对偏差均小于2.0%，证明此方法的耐用性良好。
4 小结
本实验方法简便、快捷，灵敏度高，结果准确。可用于复方醋酸氟轻松乳膏质量的有效控制。
[参考文献]
[1] 中国人民解放军总后勤部卫生部.中国人民解放军医疗机构制剂规范[S].北京：人民军医出版社：186-187.
[2] 熊丽，李金涛，干国平.HPLC法测定日本薯蓣中尿囊素的含量[J].中国药房，2012，23（19）：76-78.
[3] 龙凌云，李成立，文庆，等. HPLC法测定缩泉胶囊中尿囊素的含量[J].中国药师，2013，16（4）：514-516.
[4] 郑琴，胡鹏翼，龚莹莹，等.HPLC法测定不同产地山药饮片中尿囊素和腺苷的含量[J].江西中医学院学报，2013，25（3）：32-34.
[5] 徐志红，贾晓斌，陈磊垚.HPLC测定梓木草饮片中尿囊素的含量[J].中国实验方剂学杂志，2012，18（23）：112-114.
[6] 张志勤，李玫，朱昌辉，等.RP-HPLC法同时测定复方维A酸乳膏中尿囊素、维A酸、异维A酸和维生素E的含量[J].中国药房，2014，25（12）：1131-1133.
[7] 国家药典委员会编.中华人民共和国药典（一部）[S].北京：中国医药科技出版社，2010：136.
[8] 国家药典委员会编.中华人民共和国药典（一部）[S].北京：中国医药科技出版社，2010：557.
[9] 国家药典委员会编.中华人民共和国药典（一部）[S].北京：中国医药科技出版社，2010：930.
[10] 宋莉，黄艳，刘雪峰.气相色谱同时测定黑豆馏油软膏中桉油精和冰片的含量[J].安徽医药，2013，17（6）：958-959.
[11] 曾小平，陈新国，黄俊忠，等.GC法测定克痒敏醑中薄荷脑、冰片和水杨酸甲酯的含量[J].中药新药与临床药理，2014，25（1）：74-76.
[12] 陈筱瑜，叶桦珍，宋洪涛.气相色谱法测定复方紫黄烧伤凝胶剂中冰片含量[J].福建中医药，2013，44（1）：49-50.
（收稿日期：2015-04-15）