脑心肌炎病毒3C蛋白抑制IFN-β信号通路的研究

来源 :南京农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：zzzkkk

【摘要】

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为了探讨脑心肌炎病毒（EMCV）非结构蛋白3C对IFN-β信号通路的影响,采用RT-PCR方法构建EMCV 3C蛋白的重组真核表达质粒pVAX1-3C,将其转染至HeLa细胞,采用间接免疫荧光法（IFA）和Wes

【作者】

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闭璟珊杜以军白娟姜平

【机构】

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南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,山东省农业科学院畜牧兽医研究所、山东省动物疫病控制与繁育重点实验室

【出处】

：

南京农业大学学报

【发表日期】

：

2014年3期

【关键词】

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脑心肌炎病毒(EMCV) 3C蛋白 Ⅰ型干扰素 encephalomyocarditis virus 3C protein typeⅠinterferon

【基金项目】

：

江苏省自然科学基金项目（BK20130691）,教育部高等学校博士点基金项目（20120097110043）,国家生猪产业技术体系专项（CARS-36）,江苏高校优势学科建设工程资助项目（PAPD）

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为了探讨脑心肌炎病毒（EMCV）非结构蛋白3C对IFN-β信号通路的影响,采用RT-PCR方法构建EMCV 3C蛋白的重组真核表达质粒pVAX1-3C,将其转染至HeLa细胞,采用间接免疫荧光法（IFA）和Western blot验证其在真核细胞内的表达和分布定位情况;利用Real-time PCR方法检测HeLa细胞表达EMCV 3C蛋白后Ⅰ型干扰素（IFN）效应因子的相对表达量,并用含有双荧光素酶（Luc）报告基因的重组载体检测分析3C蛋白在Ⅰ型IFN信号通路中的作用。结果表明：成功构建pVAX1-3

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