【摘 要】
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目的:探讨中药复方"脊髓康"对神经干细胞(Neural stem cells,NSCs)分化作用的影响。方法:制备"脊髓康"(JSK)含药血清;分离、培养原代NSCs;对NSCs进行鉴定;在胎牛血清(FBS)诱
【机 构】
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南京中医药大学骨伤修复与重建新技术实验室; 扬州大学江苏省中西医结合老年病防治重点实验;
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目(81573997):基于内质网应激IRE1/XBP1信号通路探讨温肾通督法保护脊髓损伤神经元的作用及机制,负责人:黄桂成;江苏省中西医结合老年病防治重点实验室开放研究项目(2015LNB007):温肾通督法调控微环境动员神经干细胞修复脊髓损伤的效应及机制研究,负责人:马勇;江苏省普通高校研究生科研创新计划项目(KYLX16_1147):基于小胶质细胞的趋化、吞噬作用探
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目的:探讨中药复方"脊髓康"对神经干细胞(Neural stem cells,NSCs)分化作用的影响。方法:制备"脊髓康"(JSK)含药血清;分离、培养原代NSCs;对NSCs进行鉴定;在胎牛血清(FBS)诱导NSCs分化后,加入不同剂量的JSK含药血清干预其分化,分为高、中、低剂量组,另设空白对照组,选取抗β3-微管蛋白(βⅢ-Tubulin)抗体、抗兔胶质纤维酸性蛋白(GFAP)抗体对NSCs进行免疫荧光双标,检测其分化情况,并与不加含药血清的对照组进行对比;在荧光显微镜下,对不同视野βIII-Tubulin、GFAP的阳性细胞进行计数,并算出阳性细胞数占总细胞数的百分比,并进行荧光定量。结果:培养的神经球均表打巢蛋白(Nestin);JSK含药血清高、中、低剂量组βIII-Tubulin阳性细胞所占百分比明显高于空白组(P<0.05);JSK含药血清高、中、低剂量组GFAP阳性细胞所占百分比均低于空白组(P<0.05),且高剂量组与中、低剂量组比较均有统计学意义(P<0.01)。结论:中药复方JSK促进NSCs向βIII-Tubulin阳性细胞方向分化,为中医药治疗SCI提供一定的依据。
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