人体β-防御素-3突变基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

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目的对人体β-防御素-3基因进行定点突变,并在Ecoli中表达。方法从人正常皮肤组织中提取总RNA,经RT-PCR扩增编码β-防御素-3成熟肽的cDNA,测序正确后,设计含突变位点的引物,用PCR重叠延伸法对β-防御素-3成熟肽cDNA进行定点突变,将突变产物克隆至pUC18,并在E.coil中融合表达。结果测序结果表明,经RT-PCR所得的β-防御素-3成熟肽序列与GenBank中报道的序列完全一致。经过突变,β-防御素-3成熟肽第29位谷氩酰胺密码子由CAG突变为精氨酸密码子CGA,其余核苷酸序列均未
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