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本研究以自杀性质粒pUT携带含有信号标签的Mini—Tn5转座子对猪胸膜肺炎放线杆菌血清1型茵进行转座诱变，构建了带有12对特异性信号标签的Mini—Tn5转座子的pUT自杀质粒，转化到供体茵E．coliβ155后，利用双亲本滤膜杂交法与受体猪胸膜肺炎放线杆菌血清1型菌（APP1）进行接合转移，构建并优化了接合转移体系。利用抗性和营养缺陷培养平板筛选得到接合突变体，通过抗性通用引物与12个特异标签引物和胸膜肺炎放线杆菌毒素IV（ApxIV）鉴定引物分别对这些突变体进行了PCR鉴定和测序验证。结果表明，经过