亚砷酸钠对人正常肝细胞L-02活性氧含量和细胞凋亡的影响

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目的

研究不同浓度亚砷酸钠(NaAsO2)对人正常肝细胞L-02存活情况、细胞内活性氧(ROS)水平及细胞凋亡的影响。

方法

用0(对照组)、50、100、150 μmol/L NaAsO2作用L-02肝细胞24 h后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测L-02肝细胞存活率,流式细胞仪检测L-02肝细胞内ROS水平和细胞早期(Q4期)、晚期(Q2期)凋亡程度。

结果

细胞存活率检测:不同浓度NaAsO2组细胞存活率比较,差异有统计学意义(F= 350.51,P < 0.05),其中50、100、150 μmol/L NaAsO2组细胞存活率[(87.30 ± 3.74)%、(49.03 ± 4.72)%、(13.44 ± 4.01)%]显著低于对照组[(100.00 ± 0.00)%,P均< 0.05];与50 μmol/L NaAsO2组比较,100、150 μmol/L NaAsO2组细胞存活率显著下降(P均< 0.05);与100 μmol/L NaAsO2组比较,150 μmol/L NaAsO2组细胞存活率显著下降(P < 0.05)。ROS水平检测:不同浓度NaAsO2组细胞内ROS水平比较,差异有统计学意义(F= 407.78,P < 0.05),其中100、150 μmol/L NaAsO2组细胞内ROS水平(3 212.00 ± 221.93、5 521.33 ± 179.63)显著高于对照组(1 691.67 ± 73.98,P均< 0.05);与50 μmol/L NaAsO2组(1 927.67 ± 62.45)比较,100、150 μmol/L NaAsO2组细胞内ROS水平显著增加(P均< 0.05);与100 μmol/L NaAsO2组比较,150 μmol/L NaAsO2组细胞内ROS水平显著增加(P < 0.05)。细胞凋亡检测:不同浓度NaAsO2组Q2期(晚期凋亡细胞)、Q4期(早期凋亡细胞)、Q2+Q4期(总凋亡细胞)细胞凋亡率比较,差异均有统计学意义(F= 256.84、26.53、63.89,P均< 0.05),除50 μmol/L NaAsO2组Q4期[(5.43 ± 0.57)%]外,50 μmol/L NaAsO2组[Q2期:(5.67 ± 0.21)%,Q2+ Q4期:(11.10 ± 0.40)%]、100 μmol/L NaAsO2组[Q2期:(13.60 ± 0.79)%,Q4期:(7.37 ± 2.01)%,Q2+ Q4期:(20.97 ± 2.38)%]、150 μmol/L NaAsO2组[Q2期:(13.47 ± 0.78)%,Q4期:(16.97 ± 3.45)%,Q2+ Q4期:(30.43 ± 3.84)%]细胞凋亡率均显著高于对照组[Q2期:(3.47 ± 0.12)%,Q4期:(2.90 ± 0.90)%,Q2+ Q4期:(6.37 ± 1.00)%,P均< 0.05];与50 μmol/L NaAsO2组比较,100、150 μmol/L NaAsO2组Q2、Q4、Q2+ Q4期凋亡细胞增加,除100 μmol/L NaAsO2组Q4期外,差异有统计学意义(P均< 0.05);与100 μmol/L NaAsO2组比较,150 μmol/L NaAsO2组Q4、Q2+ Q4期凋亡细胞均显著增加,差异有统计学意义(P均< 0.05)。

结论

NaAsO2可以诱导L-02肝细胞内ROS含量增加,推测NaAsO2可通过氧化损伤作用进一步诱导L-02肝细胞发生早期和晚期凋亡,从而抑制L-02肝细胞的生长。

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