伪狂犬病病毒微滴数字PCR定量检测方法的建立

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为了建立伪狂犬病病毒(PRV)微滴数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)的检测方法,以伪狂犬病病毒gB基因为靶基因,建立了可对其准确定量的微滴数字PCR方法。对ddPCR反应中的引物浓度、探针浓度、退火温度进行了优化。对建立的ddPCR方法的特异性和敏感性也进行测定,并且应用于临床样品的检测。结果表明,ddPCR的最佳引物浓度为0.9μmol·L-1,探针浓度为0.25μmol·L-1,退火温度为60℃。ddPCR方法线性相关系数(R2)为0.998,显示呈良
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