【摘 要】
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目的 探讨人表皮细胞与聚碳酸脂膜构建组织工程表皮模犁的方法,建立可用于皮肤刺激试验的组织工程表皮模型. 方法 应用组织工程方法,以聚碳酸脂膜为支架,以人皮肤角质形成细
【机 构】
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温州医学院信息工程学院,浙江温州,325035;第三军医大学大坪医院野战外科研究所皮肤科;中国药品生物制品检定所医疗器械中心
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目的 探讨人表皮细胞与聚碳酸脂膜构建组织工程表皮模犁的方法,建立可用于皮肤刺激试验的组织工程表皮模型. 方法 应用组织工程方法,以聚碳酸脂膜为支架,以人皮肤角质形成细胞为细胞来源,构建组织工程表皮模型.气液面培养13 d,通过HE染色、角蛋白10(keratin 10,K10)和K13抗体、K14抗体、层粘连蛋白抗体、角化细胞交联外膜蛋白抗体、中间丝相关蛋白抗体免疫荧光染色、透射电镜观察组织工程表皮模型组织结构.采用快速渗透试验方法,SDS分别作用于培养基中添加脂质物(实验组)和未添加脂质物(对照组)的组织上程表皮模型18 h,测定组织活性减小50%所需化学物质的浓度(halfmaximal inhibitory concentrationofa substance,IC50)值. 结果 HE染色、免疫荧光染色及透射电镜观察显示,构建的组织工程表皮模型分化良好,具有与正常表皮相似的结构:基底膜、棘层、颗粒层和角化层.实验组和对照组组织工程表皮模犁的IC50值分别为0.183%(6.00 mmol/L)和0.072%(2.36 mmol/L). 结论 在聚碳酸酯膜上构建的组织工程表皮模型具有与正常表皮相似的组织结构,并且具有一定的屏障功能.
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