MDR1、GSTπ特异性siRNA真核表达载体的构建及表达

来源 :复旦学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户：cnforyou2009

【摘要】

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目的构建多药耐药基因（MDR1）、谷胱甘肽S-转移酶（GSTπ）特异性小干扰RNA（siRNA）真核表达载体并检测其表达.方法参照siRNA模板设计原则,设计并化学合成2条siRNA模板序列,退火后将其

【作者】

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冯敏华张弢顾静文林果为

【机构】

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现在宁波大学卫生职业技术学院内科教研室,复旦大学附属华山医院检验中心,复旦大学附属华山医院血液科

【出处】

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复旦学报(医学版)

【发表日期】

：

2006年1期

【关键词】

：

小片段干扰RNA 多药耐药谷胱甘肽S-转移酶多药耐药基因 siRNA multidrug resistance glutathione S-transf

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目的构建多药耐药基因（MDR1）、谷胱甘肽S-转移酶（GSTπ）特异性小干扰RNA（siRNA）真核表达载体并检测其表达.方法参照siRNA模板设计原则,设计并化学合成2条siRNA模板序列,退火后将其插入质粒pSilencer2.1-U6,限制性酶切和基因测序进行鉴定.脂质体介导下转染K562/Adr细胞,实时荧光定量PCR分析MDR1、GSTπ mRNA的表达,荧光免疫组化检测Pgp、GSTπ蛋白的表达.结果重组质粒pSilencer2.1-MDR1、GSTπ经酶切、测序分析表明siRNA模板序列成功

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