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目的
采用耳窥镜直视下气管插管法构建小鼠新型隐球菌肺炎合并脑膜炎模型。
方法20只雄性C57BL/C小鼠分为正常对照组和感染组，每组均为10只，实验当日小鼠在耳窥镜直视下行气管插管后，感染组沿气管内插管注射10 μL新型隐球菌，正常对照组沿气管内插管注射10 μL氯化钠溶液，在注射细菌后的0 h、第3、5、7和10天观察小鼠一般情况和体质量，于0 h每组处死3只小鼠，第10天处死剩余小鼠，进行小鼠肺脏、肝脏、脾脏和脑组织等组织菌落计数和肺、脑组织病理检查以判断肺炎合并脑膜炎模型是否构建成功。
结果感染组10只小鼠行耳窥镜直视下气管插管，均获成功，无小鼠插管后死亡。沿气管内插管注射菌液浓度为2.0×109菌落形成单位(colony-forming units, CFU)/mL，气管插管后0 h处死小鼠取肺并定量，其菌落计数为(7.84±0.13) lg CFU/g。2组小鼠观察至感染后10 d，均无小鼠死亡。第10天小鼠肺内菌量平均值达到(8.11±0.81) lg CFU/g，与0 h比较略有增加，第10天小鼠脑组织内菌量达到(4.84±0.21) lg CFU/g。病理结果提示支气管、肺泡及间质内见大量隐球菌，脑实质内见灶性隐球菌浸润。
结论采用耳窥镜直视下气管插管法成功构建了小鼠新型隐球菌肺炎合并脑膜炎模型，方法操作简便，成功率高。