【摘 要】
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目的 探讨LASS2/TMSG1对人肺癌95C细胞增殖和凋亡的影响及发病机制。方法 采用RT-PCR、Western blot法检测LASS2/TMSG1在人不同转移潜能肺癌细胞系95C（低转移潜能）和95D（高转移潜能）中的表达。应用慢病毒转染法将靶向沉默LASS2/TMSG1基因的LV-CERS2-RNAi（30011-1）转染至95C细胞;流式细胞术及MTT检测肿瘤细胞的体外增殖和凋亡情况;
【机 构】
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内蒙古医科大学基础医学院病理学教研室
【基金项目】
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内蒙古自治区自然科学基金（2019MS08115）； 2022年自治区卫生健康科技计划项目（202202137）；
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目的 探讨LASS2/TMSG1对人肺癌95C细胞增殖和凋亡的影响及发病机制。方法 采用RT-PCR、Western blot法检测LASS2/TMSG1在人不同转移潜能肺癌细胞系95C（低转移潜能）和95D（高转移潜能）中的表达。应用慢病毒转染法将靶向沉默LASS2/TMSG1基因的LV-CERS2-RNAi（30011-1）转染至95C细胞;流式细胞术及MTT检测肿瘤细胞的体外增殖和凋亡情况;倒置显微镜观察细胞常规培养下的状态,透射电镜观察细胞线粒体超微结构的变化;荧光显微镜结合JC-1染液观察细胞线粒体膜电位的变化;Western blot法检测细胞中LASS2/TMSG1、Akt3、P-Akt3、Bax、BCL-2的表达水平。结果 LASS2/TMSG1在95C细胞中的mRNA（t=16.85,P=0.004）及蛋白表达水平（t=15.26,P=0.004）明显高于95D细胞;LASS2/TMSG1沉默后,95C细胞中LASS2/TMSG1 mRNA （F=164.053,P ＜0.001）和蛋白（F=18.293,P=0.003）的表达明显降低;流式细胞术检测LASS2/TMSG1基因沉默组细胞的凋亡率明显降低（F=17.340,P=0.003）;MTT检测显示LASS2/TMSG1沉默组细胞从第4天（F=66.318,P＜0.001）、第5天（F=224.582,P＜0.001）开始,细胞增殖率明显增高;电镜和荧光显微镜观察发现,LASS2/TMSG1基因沉默,对线粒体膜电位水平的下降有干扰作用（F=14.687,P=0.005）;P-Akt3蛋白（F=28.628,P ＜0.001）及BCL-2蛋白（F=6.049,P=0.036）表达水平升高;Akt3、Bax蛋白表达量无相关性。结论 LASS2/TMSG1基因可能抑制V-ATPase活性,使细胞内H+浓度升高,线粒体膜电位降低,线粒体凋亡通路中的相关蛋白释放促进95C细胞凋亡。
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